清见杂柑果实生长发育过程中miR160和miR167及其靶向基因的表达研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wgsnt1
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本试验以清见杂柑为材料,于2016-2017年在四川省遂宁市射洪县金华镇进行相关试验并采集试验样品。分别测定了清见杂柑果实生长发育过程中纵横径及其生长量和IAA含量的动态变化;同时克隆了清见杂柑miR160和miR167成熟体及其靶基因并通过实时荧光定量PCR分别测定了它们在果肉和叶片中相对表达量的动态变化,探究miR160和miR167及其靶基因在转录后水平上与清见杂柑果实生长发育的关系,以期对晚熟类柑橘果实生长发育在转录后调控中积累一定理论基础。研究结果如下:
  (1)在清见杂柑果实生长发育过程中果实纵横径增长趋势趋于平缓,果肉内的IAA含量在果实膨大期和转色期出现下降-上升的动态变化,因而认为在此期间果肉内的IAA参与了果实膨大以及转色相关的代谢过程。在花后270d前果肉中IAA含量与叶片中IAA含量的动态变化趋势相反。表明叶片和果肉间的IAA存在交替消长的规律,这和清见杂柑果实生长发育以及两者间的代谢变换相关。
  (2)根据NCBI和miRBase数据库相关基因序列,通过克隆获得了清见杂柑中miR160、miR167和miR167a/b/c的成熟体以及ARF2和ARF8编码区,序列分析表明ARF2和ARF8蛋白符合典型的ARF蛋白结构,且这些基因与甜橙相关基因相似度高,表明了这些基因在同源物种中均具有较高的保守性。
  (3)经实时荧光定量表达分析发现,在清见杂柑果实生长发育前期果肉中ARF2和ARF8都有显著的上调,而前期miR160表达变化不明显,miR167以及miR167a/b/c都有显著的下调,表明在清见杂柑果实生长发育前期miR167以及mi R167a/b/c与其靶基因ARF8发生了相互作用,抑制了ARF8的表达。后期ARF2表达下调时miR160表达上调,表明在清见杂柑果实生长发育后期miR160与其靶基因ARF2发生了相互作用,抑制了ARF2的表达。后期ARF8表达变化不明显而miR167以及miR167a/b/c有明显表达表明它们在这段时间参与了其他基因的调控。
  (4)经实时荧光定量表达分析发现,在清见杂柑果实生长发育前期的叶片中,ARF2表达呈现出上调-下调-上调-下调趋势,而此时miR160呈上调趋势,表明除了miR160外还有其它因素影响了ARF2的表达,参与了生长素的调控。miR167和miR167a/b/c都在花后180d相对表达量达到最大值,此后除了在花后270d时出现表达上调外,都保持在一个很低的水平,而ARF8在花后90d明显下调后其表达量都保持在很低的水平,表明叶片中的miR167表达的变化只在果实膨大期前对ARF8表达有负调控,而后期影响不明显,可能是对其他基因进行了调控。
其他文献
微乳液能否作为高效的口服递送载体是近几年来微乳液应用研究的方向之一。本文基于前期筛选出的两种不同结构的微乳液,探究其作为口服递送载体的可行性,同时对负载α-亚麻酸(ALA)微乳液的释放动力学数据进行系统研究,旨在为其应用于营养因子的递送提供理论基础。首先通过测定两种载体在消化环境中粒径、多分散指数(PDI)、透射电镜图(TEM)和核磁图谱(NMR)等,表征两种微乳液的物理化学性质及微观结构的变化。
学位
土壤盐渍化是制约全球农业可持续发展与威胁粮食安全的一种重要非生物逆境。揭示作物耐盐机理是当前作物科学的研究热点,对于培育耐盐作物品种、促进盐碱地的高效利用具有重要的理论与实践意义。植物种间耐盐性存在显著的差异,在禾谷类作物中,水稻(Oryza sativa)较弱,而大麦(Hordeum vulgare)较强,但两者耐盐性差异的分子机制迄今仍不清楚。本论文首先从离子组、代谢组、转录组和可变剪切水平上
学位
干旱和盐害是严重制约农作物产量和威胁粮食安全的世界性问题,随着全球气候变暖,高频率和高强度干旱成为制约农业生产的主要因素,对世界粮食安全带来严峻挑战。干旱和盐害具很大的相关性,均会导致植物细胞缺水,引起植物细胞渗透胁迫和离子胁迫;而且,在自然生态系统和农业生态系统中这两种逆境常同时发生,形成旱、盐双重胁迫,对植物造成更严重的危害。提高作物的耐/抗盐和干旱能力是解决缺水干旱、有效利用盐碱地资源,应对
学位
盐胁迫是全球普遍存在的农业生产问题,严重影响作物产量和品质。培育和种植具有较强盐耐性的作物品种,是有效利用盐碱地的重要途径之一。不同作物对盐胁迫的响应具有显著差异,一些作物具有主动的响应机制,能够提高作物对盐胁迫的适应性,而另外一些作物的生长则会受到极大的抑制。小麦和大麦是全球重要的粮食作物,小麦是禾谷类粮食作物中对盐胁迫最敏感的作物之一,而大麦的耐盐性常优于其它禾谷类作物。本研究以前期鉴定到的盐
学位
油菜是一种具有重要经济价值的作物,其主要用途是榨取菜籽油,而榨油剩余的菜籽饼可以作为优质动物饲料。油菜等十字花科植物的叶子与种子富含硫代葡萄糖甙(glucosinolates,GSLs;简称硫甙)。硫甙是一种具有抵御害虫侵害与病菌感染的特殊次生代谢产物,它对于人体还具有抗癌的功效,有着重要的药理学意义。然而,种子中存在的硫甙却不利于菜籽饼用作动物饲料,因为高含硫甙的菜籽饼被动物食用后会引起甲状腺疾
学位
土壤盐渍化是影响世界农业生产的重要因素之.如何开发利用盐渍土已成为农业生产和环境生态学亟待解决的问题.红麻是一种高价值的工业纤维经济作物,具有较大的商业价值,同时,因其具有的耐盐性以及巨大的生物学产量等特性,可以作为盐渍化土壤的修复植物.目前,有不少关于红麻耐盐性的研究,但相关研究主要集中于耐盐栽培、生理响应等,有关红麻耐盐分子机理方面的研究却鲜有报道.  因此,本研究主要以红麻P3A(耐盐品系)
学位
随着我国人民生活水平的提高,消费者对稻米品质的要求越来越高。目前种子市场水稻品种类型繁多、品种间品质和产量的差异较大,并且不同类型品种的区域适应性也存在着较大的差异。针对以上问题前人也进行过较多的品种筛选研究,但往往仅局限于产量或者生育期等少数几个方面的筛选,且未形成较为完整的筛选方法和评价指标体系。针对上述突出问题,本试验于2017-2018年在扬州大学校外淮安、宿迁、黄海农场和东海基地进行,以
学位
该研究选用具有不同基因型的台中65F花粉不育近等基因系(NIL)为材料,利用微卫星标记对49个NILs进行导入片段的分析,并对S-b座位进行了定位,取得了以下的主要结果:1.选用12条染色体上均匀分布的158个微卫星标记对49个NILs的导入片段进行了分析;2.通过导入片段与花粉育性的比较分析,发现E11-5中可能存在尚未定位的F花粉不育基因座位;3.通过导入片段与花粉育性的比较分析,发现E22-
该实验采用VB和La协同作用,在水稻幼苗期(五叶一心)处理,以提高水稻对外界不良环境因子的抵抗能力,促进水稻幼苗的生长发育,为水稻高产稳产打下基础.结果表明:VB和La两者具有累加效应,VB和La协同作用对水稻(Oryzea Sativa L.)幼苗生长及提高抗逆性具有促进效应,在一定的浓度范围内处理安全可靠.用复配剂4g/L(内含0.28g/L VB和0.4mg/l La)浓度处理时可达到最佳效
学位
杂种不育性是利用栽培稻(Oryza sativa L.)籼粳亚种间杂种优势的主要障碍.花粉不育是导致杂种不育的主要因素.研究这种花粉不育性的遗传基础乃至分子机理,在遗传学基础理论和农业生产实践上都有着重要和深远的意义.在张桂权、庄楚雄分别在经典遗传学和分子遗传学的研究结果基础上,该研究利用与花粉不育基因Sc座位完全连锁的分子标记RG227、RG391和日本RGP第3染色体上具有偏态分离特性的分