黄曲霉毒素B₁（Aflatoxin B₁,AFB₁）广泛存在于发霉的原料和饲料中,是由黄曲霉和寄生曲霉等产生的毒性最强的一种次级真菌毒素产物,具有很强的免疫毒性和致癌性。硒作为一些抗氧化酶和硒-P蛋白的重要组成部分存在于动物和人体中,是人和动物生长所必需的微量元素,具有抗癌、抗氧化、提高机体免疫力和拮抗某些毒素的功能。有研究表明,免疫细胞的过度凋亡是引起免疫抑制的重要原因,且有关硒拮抗AFB₁对机体的危害报道也逐渐引起人们的关注。目前,关于AFB₁导致雏鸡免疫器官细胞凋亡的研究已有一些报道,但AFB₁导致免疫器官细胞凋亡的信号通路的研究还比较匮乏。本试验将288只1日龄健康科宝雏鸡随机分为四组,分别饲喂对照日粮（AFB₁=0mg/kg,Se=0.3mg/Kg）、+Se组日粮（Se=0.7mg/Kg）、AFB₁日粮（AFB₁=0.6 mg/kg）和AFB₁+Se组日粮（AFB₁=0.6 mg/kg,Se=0.7mg/Kg）21天。用组织病理学、流式细胞术、TUNEL染色及RT-qPCR等方法检测雏鸡脾脏指数、细胞凋亡及死亡受体通路和内质网通路中相关基因的表达量,探究AFB₁对雏鸡脾脏细胞凋亡信号通路的影响及硒对其拮抗作用的分子机制。其结果如下:7日龄时,与对照组和+Se组相比,AFB₁组和AFB₁+Se组雏鸡脾脏绝对重量和脾脏指数无显著性差异（p>0.05）。14日龄时,AFB₁组脾脏绝对重量显著或极显著低于对照组、+Se组和AFB₁+Se组（p<0.05或0.01）;21日龄时,AFB₁组脾脏绝对重量显著或极显著低于对照组和+Se组（p<0.05或0.01）。14和21日龄时,AFB₁组脾脏指数显著低于对照组（p<0.05）。组织病理学检测结果表明,7日龄时,各组无明显病理学变化。14日龄和21日龄时,AFB₁组鸡脾脏红髓区出现淤血,椭球内出现大量不规则空白区域,脾小结内淋巴细胞数量减少。+Se组脾脏组织形态学结构与对照组相似,组织结构正常。AFB₁+Se组雏鸡脾脏组织结构趋于正常。流式细胞术检测结果显示,7、14和21日龄时,AFB₁组脾脏细胞凋亡率均极显著地高于对照组和+Se组（p<0.01）;AFB₁+Se组脾脏细胞凋亡率显著低于AFB₁组（p<0.05）;+Se组雏鸡脾脏细胞凋亡率与对照组相比无显著性差异（p>0.05）。TUNEL染色结果显示各组间TUNEL阳性细胞数量变化规律与流式细胞术检测结果一致。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组和+Se组相比,7、14和21日龄时,AFB₁组雏鸡脾脏细胞Caspase-3、Caspase-8、Caspase-10、TNF-α、TNF-R1、FasL、Fas、GRP78和GRP94的mRNA表达量显著升高（p<0.05或0.01）;与AFB₁组相比,AFB₁+Se组雏鸡脾脏Caspase-3、Caspase-8、Caspase-10、TNF-α、TNF-R1、FasL、Fas、GRP78和GRP94的mRNA表达量显著降低（p<0.05或0.01）。+Se组与对照组相比无显著性差异。综上所述,日粮中0.6mg/kg AFB₁可导致雏鸡脾脏指数减低,淋巴细胞减少,细胞凋亡增多,死亡受体通路相关分子Caspase-3、Caspase-8、Caspase-10、TNF-α、TNF-R1、FasL和Fas以及内质网通路相关分子GRP78和GRP94的mRNA表达量上调;在日粮中额外添加0.4 mg/kg硒（以亚硒酸钠为硒源）可减缓上述变化。说明AFB₁可能通过激活死亡受体和内质网通路中的凋亡分子导致脾脏细胞过度凋亡,而硒可能通过拮抗AFB₁对上述两条通路的影响而发挥保护功能。