目的:自身免疫性肝损伤,是人类自身免疫性肝病如自身免疫性肝炎（Autoimmune hepatitis,AIH）、原发性胆道胆管炎（Primary biliary cholangitis,PBC）或原发性硬化性胆管炎（Primary sclerosing cholangitis,PSC）的临床特征。尽管上述疾病的成因各异,机制也不十分清楚,但一般认为活化的T细胞在介导自身免疫性肝损伤中起着重要作用。T细胞是适应性免疫的重要组成部分,通过细胞表面的T细胞受体（TCR）与抗原呈递细胞（包括树突状细胞和巨噬细胞）表面的主要组织相容性分子所结合的抗原肽接触,同时T细胞表面的CD28分子与抗原呈递细胞表面的共刺激分子结合。两种细胞之间的这种分子结合,形成免疫突触,诱导T细胞内多途径的信号转导,包括m TOR信号的激活,从而刺激T细胞增殖。临床免疫抑制药物雷帕霉素的免疫抑制作用在很大程度上是因为它能阻断T细胞的活化,因此T细胞是防止自身免疫性肝炎中的潜在靶标。刀豆蛋白A（Concanavalin A,Con A）诱导的小鼠急性肝炎是研究活化T细胞介导肝损伤的理想模型。Con A是从豆科植物种子刀豆中提取的一种植物凝集素（糖蛋白）,具有强烈的促有丝分裂活性（因而是一种丝裂原,mitogen）,可强烈诱导T细胞活化,并使之大量增殖。将Con A注射到小鼠体内,其一方面与血管内皮细胞甘露糖受体结合,另一方面也强烈激活T细胞,使之大量聚集于肝血窦,释放TNF-ɑ、IFN-γ等炎症细胞因子,导致肝细胞死亡,从而造成肝损伤。传统中药材蒲公英作为一种药食同源的中药自古以来被应用于传统东方医学中。蒲公英具有清热解毒,消肿散结,利尿通淋之功效,对乳痈乳疖等炎症有特效,其抗炎药效记载于多种中医重要典籍中,其中《本草纲目》载明,蒲公英为“足少阴肾经君药也,本经必用之”;《本草经疏》谓之“解热凉血之要药”,足见其在抗炎中药中的重要地位。该药单味即起效,这促使我们探索其抗炎成分的药理机制。蒲公英甾醇是从蒲公英中提取的有效活性成分,过去的研究表明蒲公英甾醇具有多种生物活性,包括抗炎、抗氧化和抗肿瘤等,其中抗炎活性得到较广泛研究,但具体机制尚不清楚。本研究中,我们用Con A诱导的急性肝炎动物模型以及利用小鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞为研究对象,探讨蒲公英甾醇对T细胞活化、增殖以及Con A诱导的小鼠急性肝炎的影响及其机制。方法:1.通过对C57BL/6J小鼠尾静脉注射Con A,建立急性肝炎模型。2.利用酶联免疫吸附法（ELISA）检测小鼠血清中的谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）的水平。3.利用流式微球陈列技术（Cytometric bead array,CBA）测定细胞培养上清和动物血清中IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ、TNF-ɑ、IL-17A和IL-10的含量。4.体外分离小鼠肠系膜淋巴结细胞及培养。5.WST-1检测蒲公英甾醇对Con A刺激后的小鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞的增殖。6.用CD3、CD25（IL-2受体ɑ链,IL-2Rɑ）、CD69流式抗体标记小鼠淋巴细胞,流式细胞术检测T细胞表面分子表达情况。7.蛋白质免疫印迹法检测细胞裂解产物m TOR通路相关蛋白（AKT、p70S6K1、4E-BP1）以及IL-2信号通路相关蛋白（STAT5、PDK1和CAMKII）的表达水平。结论:蒲公英甾醇能有效减少Con A诱导的急性肝炎中血清ALT和AST水平以及TNF-α、IL-2和IL-6的产生,减轻肝脏坏死程度。此外,蒲公英甾醇可以抑制Con A诱导的小鼠淋巴细胞增殖,降低其表面分子CD25（IL-2Rα）表达和IL-2的分泌,并抑制Con A诱导的m TOR信号与IL-2信号的激活。提示蒲公英甾醇可能通过抑制IL-2和IL-2Rα表达以及m TOR信号通路从而抑制T淋巴细胞的增殖,并且减轻依赖T细胞激活的Con A诱导的急性肝炎症状。