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IL-6/sIL-6R对人脐血CD<,34><+>细胞体外扩增的作用背景和目的:造血干细胞具有自我更新,多向分化与重建长期造血的潜能,因此造血干细胞广泛应用于干细胞移植、免疫治疗、基因治疗等领域.脐带血中富含造血干细胞,但单份脐带血中造血干细胞的数量有限,不能充分满足临床和科研需要,因此在体外培养使脐带血干/祖细胞数量扩增的研究日益受到重视.已知一些细胞因子可以在体外培养中使脐血干/祖细胞大量扩增.新近发现IL-6/sIL-6R(可溶性IL-6受体)或其融合蛋白可促使脐带血CD<,34><+>细胞中CD34<+>gp130+IL-6R<->细胞亚群在体外培养中大量扩增.该实验旨在观察IL-6/sIL-6R在脐带血CD<,34><+>细胞体外扩增中的作用,并探讨合适细胞因子组合.方法:脐血CD<,34><+>细胞用Mini MACS分离,然后在体外含有不同细胞因子组合的液体培养基中培养7或14天,培养前后分别进行有核细胞计数、用FCM(流式细胞术)测定CD<,34><+>细胞比例、计算CD<,34><+>细胞总数、及CFU-GM集落培养,比较不同细胞因子组合对细胞培养结果的影响.根据不同细胞因子组合进行分组:A、空白对照组B、SCF组C、IL-6/sIL-6R+SCF组D、IL-6/sIL-6R+SCF+FL组E、SCF+FL组.结果:(1)A组和B组CD<,34><+>细胞数量在培养7或14天后明显下降.(2)C组培养7、14天分别使有核细胞及CD<,34><+>细胞绝对数扩增7.1±2.4倍、39.0±14.0倍;1.8±0.7倍、4.8±2.4倍.D组16.5±5.7倍、110.0±28.0倍;3.5±1.5倍、10.2±4.2倍;E组17.3±3.8倍、104.0±21.0倍;3.6±2.1倍、8.4±3.5倍.上述三组与A组及B组差异均有显著性(p<0.01),其中D组和E组扩增效果优于C组(p<0.05),但是D组和E组之间差异无显著性(p>0.05).(3)增加sIL-6R浓度,当sIL-6R浓度为400ng/ml时,细胞培养7天,D组分别使有核细胞及CD<,34><+>细胞绝对数扩增24.0±4.8倍、5.6±1.2倍优于E组(p<0.05).(4)SCF+FL+IL-6组细胞培养7天有核细胞总数明显扩增,但CD<,34><+>细胞比例下降较显著,且CD<,34><+>细胞扩增数量均低于其他组.结论:(1)IL-6/sIL-6R可以和SCF、FL产生协同作用,使人脐带血CD<,34><+>细胞在体外扩增、并维持其分化潜能.但这种协同作用存在对sIL-6R的浓度依赖性.较高浓度协同作用明显.(2)同时使用IL-6/sIL-6R在扩增脐血CD<,34><+>细胞数量及维持其分化能力两方面均优于单独使用IL-6.