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茉莉酸作为一种重要的植物激素,广泛参与了植物对病虫侵害和机械损伤等生物胁迫及非生物胁迫的免疫反应过程,且对植物的生长发育具有非常重要的调控功能。在茉莉酸信号转导过程中,位于细胞核内的受体COI1(COronatine Insensitive1)在结合活性形式的茉莉酸JA-Ile(JAsmonoyl-Isoleucine)后,迅速将抑制子JAZ(JAsmonate-ZIM domain)蛋白降解,引起由核心转录因子MYC2所介导的全基因组范围内的转录重编程,激活茉莉酸响应基因的表达。由此可见,茉莉酸的信号感知和转录因子介导的转录调控过程是紧密耦联在一起的,而负责信号感知的受体是如何与转录调控下游的转录机器及染色质修饰相关的表观遗传因子等进行信号交流,从而使茉莉酸响应基因特异表达的分子机制尚不清楚。我们实验室前期的研究表明,转录中介体亚基MED25(MEDIATOR25)与MYC2相互作用,将RNA聚合酶Ⅱ招募到MYC2靶标基因的启动子区,精细调节MYC2的转录调控活性。 在本论文所述工作中,我们发现MED25除了与MYC2互作以外,还与受体COI1存在直接互作,这暗示了信号感知和转录调控通过MED25直接关联。染色质免疫共沉淀实验证明COI1能够在MYC2靶标基因启动子区特异性富集且这种富集受到JA-Ile的调控,说明茉莉酸的信号感知就发生在转录活性染色质上。更重要的是,在med25-4突变体中,COI1的富集显著降低,表明COI1在活性染色质上的富集依赖于MED25。此外,MED25还与部分JAZ蛋白存在直接互作并影响了JA-Ile诱导的COI1-JAZ结合及JAZ蛋白的降解,表明MED25直接影响了茉莉酸的信号感知过程。SCFCOI1-JAZ-MYC2经由MED25的整合而将信号感知与转录调控紧密耦联,也恰与动物的激素核受体本身就是转录因子有异曲同工之处。同时,我们还检测到MED25与表观遗传因子组蛋白乙酰基转移酶HAC1(Histone ACetyltransferase1)相互作用,在hac1-4突变体中,茉莉酸诱导的响应基因表达显著降低,并且MED25和COI1在MYC2靶标基因染色质区的富集也受到影响,说明HAC1也被MED25招募并且参与MYC2介导的转录调控过程。通过蛋白免疫共沉淀实验,我们发现COI1、MED25、MYC2及HAC1存在于同一个蛋白复合体中,说明它们在植物体内很可能是整合在一起发挥生理作用。 综上所述,我们的研究表明,在茉莉酸信号转导途径中,MED25整合了受体复合物等遗传因子和表观遗传因子,共同参与转录因子MYC2对茉莉酸响应基因的表达调控。