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课题组前期研究发现苋菜（Amaranthus tricolor）提取物对多种植物病原细菌具有抑制作用,如:西瓜细菌性果斑病菌、柑橘溃疡病菌、水稻细菌性条斑病菌等,究竟何种物质在发挥作用,其成分是什么,针对这个科学问题,本研究以西瓜细菌性果斑病菌（Acidovorax avenae subsp.citrulli）为靶标菌,开展苋菜提取物的分离纯化研究,并借助TLC、柱色谱、NMR等技术解析活性成分,旨在为下一步开发抑菌先导化合物提供理论依据。主要研究结果如下:（1）靶标菌的致病性测定及鉴定:采用针刺接种法评价靶标菌的致病性。结果发现:西瓜叶片经针刺处理3d后,靶标菌侵染的西瓜种苗叶片呈现水渍状斑点,斑点逐渐向子叶基部扩展为条形或不规则形暗绿色水渍状病斑,后又转变成褐色坏死斑,并伴随有黄色晕圈。说明靶标菌对西瓜具有致病性,符合测试要求,具有作为靶标菌的条件。将靶标菌活化后,通过提取DNA、PCR扩增、凝胶电泳以及系统发育分析发现,靶标菌株（strain LQ-2）与模式菌株ATCC（NR＿102856.1）的同源性为99%,因此将其鉴定为西瓜细菌性果斑病菌（A.avenae subsp.citrulli）。（2）苋菜抑菌最优品种的筛选:采用室内平板抑菌圈法评价苋菜不同品种粗提取对A.avenae subsp.citrulli的活性。研究结果发现:红圆叶苋菜（HYY）抑菌效果最好,其抑菌圈直径为1.86cm,其次为赣科大圆叶红苋菜（GYH）,其他按照抑菌圈直径从大到小的顺序依次排列为严选红圆叶苋菜（YHY）、红柳叶苋菜（HLY）、新选白圆叶苋菜（XBY）、绚丽全红柳叶苋菜（XHL）、青叶尖苋菜（QYJ）、野生苋菜（YSX）,红圆叶苋菜为最佳抑菌供试材料品种。（3）苋菜叶化学成分初探:采用顶空固相微萃取一气相质谱联用技术（HS–SPME–GC–MS）对苋菜叶成分进行分离及鉴定,共鉴定出42种物质,其中烷烃类、酮类、酯类、醇类和有机酸类物质为主要成分,相对峰面积分别占36.43%、28.84%、11.35%、10.03%和8.51%。进一步采用化学成分预试验法评估红圆苋菜叶酯提物的成分组成,试验结果显示:苋菜叶酯提物中含有有机酸、酚类、生物碱、黄酮类、香豆素、内酯、甾体和甾醇类物质,不含皂苷类、蒽醌类及其苷类物质和强心苷类物质。研究结果表明,苋菜叶酯提物中存在黄酮类、内酯、有机酸几类活性物质。（4）苋菜叶酯提物的分离纯化及结构鉴定:采用多种色谱柱法以及NMR技术对苋菜叶酯提物中的抑菌组分进行分离、纯化及结构鉴定。通过分离和纯化共获得6个纯化合物,化合物1、2、3、4、5和6经结构解析,分别确定为对羟基苯甲酸（P-hydroxybenzoic acid）、壬二酸（Anchoic acid）、4-羟基-5-甲氧基-苯甲酸（4-hydroxy-5-methoxy-benzoic acid）、水杨酸（Salicylic acid）、苯并呋喃-2-甲醛（Benzofuran-2-carboxaldehyde）和对香豆酸（P-coumaric acid）,其中化合物2、化合物3和化合物5均为首次从该属植物中分离得到。（5）纯化合物的室内毒力测定:采用室内平板抑菌圈法测定了6种化合物对A.avenae subsp.citrulli的抑制活性。结果证实:化合物1和化合物2对A.avenae subsp.citrulli具有较好的抑制效果,其中化合物1效果最好,抑菌圈直径为3.23 cm,其抑菌圈直径大小为化合物2的1.36倍。进一步采用平板二倍稀释法测定了化合物1和化合物2的MIC和MBC。结果发现:化合物1对A.avenae subsp.citrulli生长的MIC值为125μg/mL,MBC值均为500μg/mL,化合物2对A.avenae subsp.citrulli生长的MIC值为250μg/mL,MBC值均为1000μg/mL。说明化合物1和化合物2具有进一步评估抑菌能力的潜力。（6）纯化合物的抑菌谱测定:采用室内平板抑菌圈法评价化合物1和化合物2对4种植物病原细菌的抑制效果。结果表明:化合物1和化合物2均对所有供试植物病原细菌具有抑制作用,且其抑制作用比阳性药剂对照中生菌素高。2个化合物的对供试细菌的抑菌作用按抑菌圈直径从大到小排序均对水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv.oryzae）、柑橘溃疡病菌（Xanthomonas axonopodis pv.citri）、烟草青枯病菌（Ralstonia solanacearum）和水稻细菌性条斑病菌（Xanthomonas oryzae pv.oryzicola）。采用生长速率法测定化合物1和化合物2对7种植物病原真菌的抑菌作用。当带毒平板浓度为500μg/mL时,化合物1对辣椒疫霉病菌（Phytophthora capsici）的抑制效果最高,抑制率为52.98%,其次是辣椒炭疽病菌（Colletotrichum capsici）、棉花黄萎病菌（Verticillium dahliae.）、稻瘟病菌（Pyricularia oryzae）,对其他供试植物病原真菌均无抑制效果。化合物2对辣椒疫霉病菌的抑制作用最强,抑制率达到100%,其他按照抑制率从大到小的顺序依次排列为草莓灰霉病菌（Botrytis cinerea）、油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）、水稻纹枯病菌（Rhizoctonia solani）、棉花黄萎病菌和辣椒炭疽病菌,其对稻瘟病菌无抑制作用。研究结果表明,化合物1和化合物2具有抑菌广谱性。