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共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid, CLA)是亚油酸的同分异构体。作为一种新型功能性油脂,它在癌症、动脉硬化、肥胖症和免疫功能领域上对健康潜在的益处引起了人们的关注。目前,共轭亚油酸的生产主要采用化学合成,由于存在不安全因素,人们越来越关注生物合成方面。因此,生物合成的共轭亚油酸具有广泛的商业前景。细胞固定化技术是20世纪70年代兴起的一种生物技术。固定化细胞应用于食品工业的主要优点在于能保护细胞不受外界不利条件如酸、碱、有害离子等的影响,并且能起到连续生产的目的。本文选用嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus, La)和嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus, St)作为实验菌种进行混合发酵。采用紫外分光光度(UV)法对CLA进行定量分析。通过紫外诱变,硫酸二乙酯诱变选育到两株将LA转化为CLA能力较高的菌株,并优化了混菌发酵条件和固定化条件,使CLA产量进一步提高,从而达到连续生产和提高乳品功能性的目的。嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌原始菌株混菌发酵产CLA的最佳发酵条件为：接种量4%、菌种比例(La:St=1:1)、底物添加量4%、培养温度40℃、pH5.5、培养时间60h,在此发酵条件下CLA合成量可达151.88μg/mL。将嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌分别进行紫外诱变和硫酸二乙酯诱变处理,获得高合成CLA的突变株La-1和St-1,其中La-1的CLA产量达到62.71μg/mL,较原始菌株提高了75.71%；St-1的CLA产量达到80.41μg/mL,较原始菌株提高了105.39%。通过响应曲面法对突变株La-1和St-1进行混菌发酵,产CLA的最佳发酵条件为：温度43℃、底物添加量5%、接种量4%(La:St=1:1)、初始pH6.5,在此条件下培养48h后CLA合成量可达220.63μg/mL,比原始菌株混菌发酵的产量提高了45.27%。突变株La-1和St-1的最佳固定化条件为：氯化钙3%、海藻酸钠4%、菌体包埋量60%、胶粒直径3mm、固定化时间1h；最佳混菌发酵条件：培养温度40℃、培养时间36h,在此发酵条件下CLA合成量可达291.70μg/mL。比突变游离菌株的产量提高了32.21%,比原始游离菌株的产量提高了92.06%。