论文部分内容阅读
[目的]最近,研究发现羟基红花黄色素(HSYA)作为一种新的植物提取物能够抑制四氯化碳联合高质饮食诱导的肝纤维化。尽管羟基红花黄色A的抗纤维化作用已被广泛研究,但是具体机制仍然不清楚。我们的研究将阐述它通过调节PPAR-γ /p38MAPK信号通路抑制肝纤维化的形成。[方法]1.采用四氯化碳灌胃联合高质饮食喂养建立大鼠肝纤维化模型；取大鼠血清利用生化试剂盒检测肝功能指标AST, ALT及肝纤维化因子HA, LN, III-C, IV-C在不同组间表达水平；利用碱性水解法羟脯氨酸试剂盒测定肝组织匀浆中羟脯氨酸在不同组间含量。2.,利用HE染色及Masson染色法观察肝纤维化组织病理学改变及肝纤维化程度。3.利用免疫组化及酶联免疫法测定肝组织中TGF-β1, TIMP-1, MMP-2, TNF-α蛋白表达量不同组间的水平。4.利用RT-PCR技术及western blot技术在基因水平及蛋白水平测定肝组织中PPAR-γ, p38MAPK, p-p38MAPK, TGF-β1, TIMP-1, MMP-2在不同组间的表达水平。[结果]1.同正常组相比,实验组肝功能指标AST, ALT;肝纤维化因子HA, LN, Ⅲ-C、IV-C的表达水平及肝组织匀浆中羟脯氨酸的含量明显增加,GW9662组增加最明显。HSYA组及HSYA+GW9662组较模型组增加较少,这种改变在HSYA组最为明显。2.正常组展示了正常肝组织的组织形态,模型组中展示了典型肝组织损伤的表现：肝组织细胞脂肪变性,肉芽组织生成,炎症细胞浸润,胶原纤维沉积及假小叶形成。与模型组相比,GW9662组这种表现更为明显。HSYA能够明显改善肝损伤。3.同正常组相比,实验组中TGF-β1, TIMP-1,TNF-α蛋白表达量明显增多,GW9662组增多最显著。HSYA组及HSYA+GW9662组较模型组增加较少,这种改变在HSYA组最为明显。然而,MMP-2变化趋势与上述相反。4.同正常组相比,实验组TGF-β1, TIMP-1基因表达量明显增加,GW9662组增多最显著。HSYA组及HSYA+GW9662组较模型组增加较少,这种改变在HSYA组最为明显。然而,PPAR-γ, MMP-2基因变化趋势与上述相反。基因水平变化趋势同蛋白表达结果。磷酸化p38MAPK同样表现出上述变化趋势,但总p38MAPK在各组中表达量无明显差异。[结论]1、HSYA能显著改善四氯化碳联合高质饮食诱导的肝纤维化。2、HSYA减少促进肝纤维化因子表达,增加抑制肝纤维化因子表达。3、HSYA通过调节PPAR-γ/p38MAPK信号通路抑制肝纤维化形成。