高效液化糖化高浓度玉米淀粉关键酶系的优化

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本课题隶属于十二五国家科技支撑计划课题——玉米淀粉加工关键技术与示范(2012BAD34B00)、吉林省科技厅科技成果转化计划项目——产业技术创新战略联盟项目《高品质玉米淀粉糖生产关键技术研究》(20130305026NY)。以质量分数为50%的玉米淀粉为实验原料,以液相色谱法为检测手段,采用单因素实验设计、响应面优化实验设计、正交旋转组合实验设计等研究方法,创新性地利用酶法得到高效液化糖化高浓度玉米淀粉的最佳工艺参数,并在此基础上引入超声波处理,在最佳的超声工作条件下用高效液相色谱仪检测淀粉糖浆的主要成分,对比分析超声处理对淀粉糖浆主要成分含量的影响。本文研究结果如下:(1)在高浓度玉米淀粉分步液化关键酶的研究中,综合考察了中温α-淀粉酶液化时间、中温α-淀粉酶液化温度、无水氯化钙添加量、中温α-淀粉酶加酶量、耐高温α-淀粉酶加酶量、耐高温α-淀粉酶液化时间、耐高温α-淀粉酶液化温度等因素对高浓度玉米淀粉乳液化效果的影响,以DE值为衡量指标,建立了高浓度玉米淀粉乳的分步液化反应体系,具体为:质量分数为50%高浓度玉米淀粉乳在70℃条件下,加入14u/g的中温α-淀粉酶,质量分数为0.15%的无水氯化钙,液化23min后,在94℃条件下加入12u/g耐高温α-淀粉酶,液化18min。通过两种液化酶分步液化的产物可以满足下一步糖化反应的需要。同时克服高浓度玉米淀粉乳反应过程很难搅拌与混合均匀等问题,能有效降低在糊化、液化过程中高浓度玉米淀粉乳的粘度。(2)在高浓度玉米淀粉糖化反应关键酶的优化研究中,考察了液化产物中加入淀粉葡萄糖苷酶、β-淀粉酶、普鲁兰酶三种淀粉酶共同糖化效果。通过糖化反应单因素实验和正交旋转组合试验设计,构建了回归模型方程: DE=81.73353+1.12622X1+0.88671X2+0.38926X3-0.099023X1X2+0.11772X1X3-0.24515X2X3+1.11873X12+0.39588X22+0.51361X32,建立了高浓度玉米淀粉糖化反应体系。具体为:在糖化温度为60℃的条件下,三种糖化酶加酶量依次为:β-淀粉酶的加酶量为331.8u/g、普鲁兰酶加酶量0.354AUSP、淀粉葡萄糖苷酶加酶量59.55u/g,酶解糖化时间为40h。(3)在糖化产物含量的测定及超声波辅助酶解高浓度玉米淀粉的应用研究中,以高效液相色谱法为检测手段,测定高浓度玉米淀粉糖化反应产物糖浆中主要成分的含量。采用高效液相色谱外标法,绘制葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖的标准曲线,以计算糖化反应所得糖浆中主要成分物质含量:分别为葡萄糖含量598mg/mL,麦芽糖含量20.5mg/mL,麦芽三糖含量6.5mg/mL。将高浓度玉米淀粉经超声波辅助酶解处理以超声总工作时间和总功率为研究对象进行单因素试验,以DE值为衡量指标,分别优化出在14min,240W为超声辅助酶解的最佳工艺条件。通过对比分析发现超声波前处理可以提高高浓度玉米淀粉反应速率,有助于提高淀粉糖浆中淀粉糖产量。本文得出的实验结论为高浓度底物生产淀粉糖工业提供一定理论指导,具有十分重要的意义。
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