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目的：帕金森病(Parkinson’s disease)是一种神经系统进行性退行性疾病，主要发生于中老年人群，但其病因学机制仍未清楚。本研究观察蛋白激酶Cδ亚型(protein kinase Cδ，PKCS)磷酸化激活在6羟基多巴胺(6-hydroxydopamine，6-OHDA)引起的多巴胺能神经细胞死亡过程中所起作用，探讨帕金森病中神经元缺失的分子发病机制。方法：体外培养多巴胺能神经细胞系SH-SY5Y细胞和PC12细胞，以神经毒素6-OHDA处理，模拟制造帕金森病细胞模型。通过加用PKC抑制剂和激动剂对PKC6进行干预，噻唑蓝比色法观察细胞生存率，Western免疫印迹法观察PKCδ和ERK1/2磷酸化表达，透射电镜观察细胞超微结构变化，脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal-deoxy-nucleotidyl transferase mediated nick end labeling，TUNEL)检测细胞凋亡情况。结果：6-OHDA作用18小时，SH-SY5Y细胞和PC12细胞生存率呈浓度依赖性下降；6-OHDA的半数致死量分别为92μmol/L和196μmol/L；电镜显示，6-OHDA处理组的细胞出现核固缩、染色质边集等细胞凋亡特点；两组细胞系PKCδ磷酸化均较对照组增加，差异极显著(P<0.01)；在PC12细胞中ERK1/2磷酸化表达较对照组增加(P<0.01)，细胞凋亡经TUNEL图像结果定量分析显示6-OHDA处理组凋亡率为33.8％±8.3％，明显高于对照组(P<0.01)。PKC激活剂Phorbol-12-myristate 13-acetate(PMA) 100nmol/L可产生类似6-OHDA的细胞毒性作用，SH-SY5Y细胞和PC12细胞生存率显著分别下降至49.5％±1.4％和49.8％±5.1％，使PKCδ磷酸化，并且在PC12细胞中还能引起ERK1/2磷酸化，凋亡率增加，TUNEL结果经定量图像分析有极显著差异(P<0.01)。特异性PKCδ抑制剂Rottlerin可以减轻6-OHDA引起的细胞死亡约57％(P<0.01)，同时较单用6-OHDA时PKCδ磷酸化水平降低，并且在PC12细胞中Rottlerin可有效抑制6-OHDA诱导的ERK1/2磷酸化，显著减少PC12细胞凋亡(P<0.01)。而总PKC抑制剂Bisindolylmaleimide Ⅰ和经典PKC(α、β1、β2和γ)抑制剂Go6976却6-OHDA的毒性作用无显著影响。结论：1、PKC8激活后参与6-OHDA诱导的多巴胺能神经细胞(SH-SY5Y和PC12两种细胞系)死亡。2、PKCδ磷酸化激活介导的细胞凋亡是6-OHDA诱导的多巴胺能神经细胞死亡的一种方式。3、PKCδ是6-OHDA持续性激活ERK1/2并产生细胞凋亡的上游激酶，建立60HDA→PKCδ→ERK1/2→多巴胺能神经元死亡(部分来源于凋亡)的细胞信号传导新路径。4、PKCδ激活剂PMA可使多巴胺能神经细胞(SH-SY5Y和PC12两种细胞系)生存率下降，并且是通过诱导凋亡实现。5、PKCδ抑制剂Rottlerin可减少6-OHDA引起的多巴胺能神经细胞(SH-SY5Y和PC12两种细胞系)死亡，并且在PC12细胞中Rottlerin可抑制6-OHDA诱导的ERK1/2激活从而减少PC12细胞凋亡而达到增加生存率的作用。总之，PKCδ磷酸化激活是6-OHDA发挥毒性作用的关键一环，提示其在帕金森病患者神经元缺失中起一定作用。