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基因扩增在细胞遗传学水平主要表现为双微体(double minutes,DMs)和均质染色区(homogeneously staining regions,HSRs)两种形式.双微体为细胞中成对的染色体外染色质成分,常存在于肿瘤细胞和耐药细胞中,携带的扩增基因可使细胞获得生存优势.该实验利用光镜及原子力显微镜对小鼠抗氨甲喋呤(MTX)细胞3T3R500中的双微体进行研究,以了解双微体的形态结构特点.3T3R500细胞经MTX药物筛选最终获得可耐受100μmol/L、200μmol/L、300μmol/L、400μmol/L和500μmol/LMTX的细胞群体,对不同抗药性细胞中的双微体进行观察以分析双微体随细胞抗药性的增加而演变的情况,并对有丝分裂中期染色体标本及有丝分裂各时相的提前凝集染色体标本中的双微体进行观察以探讨双微体在细胞周期中的复制、分离及分配到子细胞中的机理.通过原子力显微镜观察,我们得到了高分辨率的二维和三维双微体图像,发现有丝分裂中期双微体为染色质构成的、成对的团状结构,两单体之间由纤维相连,一部分双微体借纤维与中期染色体相连.该实验利用原子力显微镜观察到G1期PCC中绝大多数双微体以单体形式存在,而S期PCC中双微体绝大多数以双体形式存在,G2期PCC中我们观察到的双微体都紧密配对,在细胞周期中没有观察到以四体形式存在的双微体.该实验结果提示伴随着耐药性的增加,3T3R500细胞中双微体的数量增多,而双微体的大小并无显著变化.细胞周期中双微体在G1期或G1期之前分离为单体,在S期进行复制,并可能在有丝分裂后期借助其与染色体之间的连接而分配到子细胞中.