骨折后相关生长因子表达变化及其在损伤时间推断中的应用

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目的:检测大鼠骨折模型血清中相关生长因子在骨折后不同时间的含量变化,探讨骨折后相关生长因子表达变化与损伤时间的关系。建立新的骨折损伤时间推断方法,为临床骨折愈合判断提供实验依据。方法:健康雄性SD大鼠36只,随机分为对照组,假手术组及实验组,每组12只。实验组:采用开放截骨术造成大鼠右侧股骨中段横行骨折,逆行克氏针固定制成骨折模型。假手术组:切开右下肢皮肤及肌肉、缝合。各组于术后1天、3天、5天、1周、2周、3周、4周、8周、12周眼眶采取静脉血1.5m1。采用双抗体夹心ELISA法测定血清中TGF-β1、bFGF、PDGF、EGF、NGF的表达变化,测定吸光度值计算出所有样本中相关生长因子的含量,进行统计学分析。结果:1、TGF-β1血清浓度于骨折后3天开始升高,2周达空白组的两倍,3周、4周TGF-β1血清浓度开始下降,但仍高于空白组水平,骨折组与假手术组、空白组比较,大鼠血清TGF-β1浓度差异均有显著性差异(P<0.05)。8周后三组血清TGF-β1浓度变化无统计学意义(P>0.05)。2、bFGF血清浓度于骨折后第3天开始升高,并于伤后2周达峰值,3周、4周bFGF血清浓度逐渐下降,骨折组与假手术组、空白组比较,大鼠血清bFGF浓度差异均有显著性差异(P<0.05)。8周后三组血清bFGF浓度变化无统计学意义(P>0.05)。3、PDGF血清浓度于骨折后第1天开始升高,于伤后2周达峰值,3周开始下降,骨折组与假手术组、空白组比较,大鼠血清PDGF浓度差异均有显著性差异(P<0.05)。4周后三组血清PDGF浓度变化无统计学意义(P>0.05)。4、EGF血清浓度于骨折后第1天开始升高,于伤后第5天达峰值,1周开始下降,2周、3周高于正常水平,骨折组与假手术组、空白组比较,大鼠血清EGF浓度差异均有显著性差异(P<0.05)。4周后三组血清EGF浓度变化无统计学意义(P>0.05)。5、NGF血清浓度于骨折术后第1天开始升高,于2周达峰值,3周后降低,骨折组与假手术组、空白组比较,大鼠血清NGF浓度差异均有显著性差异(P<0.05)。4周后三组血清NGF浓度变化无统计学意义(P>0.05)。结论:1、TGF-β1和bFGF血清浓度骨折术后第3天明显升高,于伤后2周达峰值,其后逐渐下降,于8周接近正常。检测血清TGF-β1和bFGF可用于骨折时间推断,对2周内的骨折时间推断价值较大。2、PDGF和NGF血清浓度骨折术后第1天开始升高,于伤后2周达峰值,其后逐渐下降,于4周接近正常。检测血清PDGF和NGF可用于骨折时间推断,对2周内的骨折时间推断价值较大。3、EGF血清浓度骨折术后第1天开始升高,于伤后第5天达峰值,其后逐渐下降,于4周接近正常。检测血清EGF可用于骨折时间推断,对1周内的骨折时间推断价值较大。4、TGF-β1、bFGF、PDGF、EGF、NGF五种生长因子联合检测对2周内的骨折损伤时间的推断有重要价值。
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