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研究背景及目的:视神经脊髓炎(Neuromyelitis Optica,NMO),又被称为Devic病,是一种以体液免疫为主,细胞免疫参与的中枢神经系统的炎性脱髓鞘疾病,其与多发性硬化(multiple sclerosis,MS)不同,NMO与血清aquaporin-4免疫球蛋白G抗体(AQP4-IgG)有关。2015 年国际 NMO 诊断小组(International Panel for NMO Diagnosis,IPND)经过修订诊断标准,从而统一定义了术语为视神经脊髓炎谱系疾病(neuromyelitis optica spectrum disorder,NMOSD),其核心临床特征包括视神经炎,急性脊髓炎,延髓最后区综合征,急性脑干综合征,急性间脑综合征和大脑综合征。常见于亚洲人群,以女性多见,起病年龄较轻,复发较高。肿瘤坏死因子样蛋白 1A(Tumor necrosis factor-like ligand 1A,TL1A)属于肿瘤坏死因子样配体1家族成员,也称为血管内皮生长抑制剂(VEGI)-251,是Ⅱ型跨膜蛋白。人体内TL1A的表达主要通过Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)配体,以及促炎性细胞因子(如TNF-α,IL-1和PMA)刺激而产生。TL1A的受体是死亡结构域受体3(deathreceptor 3,DR3),主要在活化的淋巴细胞上表达,可以增强TCR刺激的T细胞对IL-2和IL-15的反应性,并与IL-12和IL-18协同作用,从而增加了 T细胞和NK细胞中IFN-γ的表达。此外,TL1A/DR3信号的共同刺激作用可增强B细胞、Th1、Th2、Treg以及Th17细胞的分化和增殖,以及IL-17、IL-23等细胞因子的分泌。增强了 T细胞参与的自身免疫性疾病和炎性疾病的靶器官中的促炎作用和T细胞免疫应答。诱骗受体3(Decoy receptor 3,DcR3)是一种可溶性诱饵受体,可以中和肿瘤坏死因子超家族(The Tumor Necrosis Factor superfamily,TNFSF)的三个成员的生物学功能:Fas配体(FasL),LIGHT和TL1A。除具有“诱饵”功能外,重组DcR3还可以通过“非诱饵”作用调节树突状细胞(DC)和巨噬细胞的激活和分化。DcR3处理的DC将T细胞分化为Th2表型,而DcR3处理的巨噬细胞则表现为M2表型。DcR3在各种癌细胞和几种炎性组织中上调,被认为是限制炎性疾病的进展和癌症转移的潜在生物标记。目前,尚未有研究其在NMOSD中的作用。TL1A和DcR3在多种自身免疫和炎症性疾病如哮喘、多发性硬化、系统性红斑狼疮、炎症性肠病、类风湿性关节炎和牛皮癣等方面的生物标志物潜力已得到广泛研究。本研究通过检测NMOSD急性期和缓解期患者血清中TL1A和DcR3的浓度,分析其余NMOSD患者临床指标的相关性,来探究两种细胞因子在NMOSD发病机制中的作用,为NMOSD的实验室诊断及治疗提供理论基础。研究方法:收集2017年9月至2020年1月期间于郑州大学第一附属医院神经内科住院治疗的NMOSD患者32例血清标本,此32例标本中女性27人,男性5人,平均年龄(37.78±16.60)岁。发病时的临床症状包括视神经炎9例,急性脊髓炎17例,延髓极后区综合征3例,脊髓炎+视神经炎1例,头晕、头痛3例。所有入选的NMOSD患者分别在急性期及缓解期采集外周血及血清标本3ml留用,并经过我院神经内科医师进行详细病史及病情过程询问、神经系统专科查体、影像学检查、实验室检查及神经电生理检查,符合2015年IPND制定的NMOSD最新诊断标准。对照组选取同时期在我院住院及门诊健康志愿者(Healthy Control,HC)26例,女性17例,男性9例,平均年龄(38.46±18.10)岁。入选的健康志愿者均无近期手术史及免疫治疗史,且均已排除自身免疫疾病、过敏性疾病及近期感染性疾病,血常规、肝肾功等各项常规检查均处于正常范围内。所有入选者采集前均禁食十小时以上,经由无抗凝剂的采血管采集肘部静脉血3ml,静置后离心,上清液分装于EP管内,放置于-80℃冰箱备用。NMOSD患者分别于疾病的急性期(发病2周内且未接受激素或丙球冲击治疗前)和缓解期(病情初步缓解后2-6个月)采集静脉血标本,健康志愿者仅采集一次静脉血标本。对入选的NMOSD患者在急性期和缓解期进行扩展残疾状态量表(Expanded Disability Status Scale,EDSS)评分以评测疾病的严重程度和病情变化,应用相应实验室检查(如CBA法检测AQP-4抗体、ELASA法检测相应自身免疫抗体等)和检查手段(包括核磁共振、CT、神经肌电图等),应用双抗体夹心酶联免疫吸附方法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组血清标本中TL1A和DcR3 水平,并分析这两种细胞因子水平在各组中的变化和与疾病的严重程度、临床指标等的相关性。应用SPSS24.0完成统计学分析。用均数±标准差表示计量资料,单因素方差分析或Kruskal-Wallis 比较多组定量资料,采用LSD-t检验或Bonferroni法进行组间比较,配对t检验进行两组间配对资料比较。应用Pearson或Spearman相关系数进行相关性分析。非正态分布的计量资料采用中位数(Median)表示,应用非参数检验进行组间比较。计数资料用例数表示,应用Fisher精确概率检验或卡方检验进行组间比较,检验水平设为0.05。结果:1、NMOSD急性期组、缓解期组和HC组血清TL1A水平比较NMOSD急性期组、缓解期组和HC组血清TL1A水平分别为(45.73±15.02)ttg/L,(27.73±10.50)ng/L和(23.77±11.74)ng/L,急性期组显著高于缓解期组和HC组,差异具有统计学意义(p<0.001,P<0.001)。2、NMOSD急性期组、缓解期组和HC组血清DcR3水平比较NMOSD急性期组、缓解期组和HC组血清DcR3水平分别为(974.77±592.66)pg/ml,(306.53±146.07)pg/ml,(261.41±104.61)pg/ml,急性期组显著高于缓解期组和HC组,差异具有统计学意义(P<0.001,P<0.001)。3、NMOSD急性期组、缓解期组血清TL1A水平、DcR3水平和EDSS评分的应用比较将NMOSD急性期组血清TL1A水平和血清DcR3水平与EDSS评分进行相关性分析,结果显示急性期与血清TL1A水平与EDSS评分呈正相关,差异有统计学意义(r=0.730,p<0.001)。DcR3水平与EDSS评分无显著相关性,差异无统计学意义(r=0.231,p=0.203)。4、NMOSD急性期组、缓解期组血清TL1A水平和血清DcR3相关性分析将NMOSD患者急性期和缓解期血清TL1A水平与血清DcR3水平进行相关性分析,结果显示急性期组血清TL1A水平与血清DcR3水平呈正相关,差异有统计学意义(r= 0.804,p<0.001)。NMOSD缓解期组血清TL1A水平与血清DcR3水平无明显相关性(r=0.286,p=0.113)。结论:1、NMOSD患者急性期TL1A水平高于缓解期及HC组,EDSS评分呈正相关性,而NMOSD缓解期患者较HC组差异不明显,提示TL1A可能在NMOSD初期阶段暨炎症发生发展阶段起到重要作用。因此,TL1A有望成为观察急性期患者病情严重程度的生物学标志物。2、NMOSD患者急性期DcR3水平明显高于缓解期及对照组,但急性期患者血清DcR3水平与EDSS评分并无明显相关性,表明DcR3在NMOSD患者急性期可能并不是导致炎症发生发展的原因,相反可能起到限制局部反应保护机体的作用。3、急性期患者血清DcR3与TL1A呈明显的正相关性,提示NMOSD急性期患者的炎症反应可能通过TL1A/DcR3这一信号传导通路来抑制炎症反应,对局部炎症反应的扩大起到抑制作用。因此,DcR3有望成为新的急性期患者减少神经损伤的靶向治疗药物。