本文对产脂肪酶发酵性丝孢酵母的透性化和固定化方法及条件进行了研究,采用固定化全细胞催化大豆油转酯化反应,透性化处理的固定化细胞使用性能得以改善,并测定了固定化细胞的保存稳定性和使用稳定性。实验结果如下：(1)在发酵起始时添加大豆油诱导菌体产酶效果最好。(2)采用细胞透性化试剂处理可改善发酵性丝孢酵母的细胞透性,使胞内脂肪酶表现出较高酶活力。用2%甲苯透性化处理细胞40min、用2%氯仿透性化处理细胞10min、用25%丙酮透性化处理细胞40min,透性化效果较好。用2%氯仿对细胞透性化处理10min,风干制得的透性化细胞胞内脂肪酶活力最高,为23.4U/g cell,保存30d酶活力为初始酶活力的91%。(3)通过以40目活性炭、硅胶G、大孔树脂DM-130为载体吸附培养发酵性丝孢酵母,发现活性炭为适宜的固定化载体。在100mL发酵液中(250mL摇瓶)加入1.0g活性炭于30℃、160rpm吸附培养48h,固定化细胞脂肪酶活力最高,可达100.88U/gcell。(4)固定化细胞透性化处理后再经0.5%戊二醛处理10min可表现出较高脂肪酶活性,与未经戊二醛处理相比,脂肪酶活力提高了67%。固定化细胞透性化处理后再经0.1mol/L葡萄糖处理120min能够显著提高其脂肪酶活力,与未经葡萄糖处理相比,脂肪酶活力提高了1.7倍。(5)将固定化细胞、透性化的固定化细胞、经戊二醛处理和葡萄糖处理的透性化的固定化细胞于4℃保存30d,脂肪酶活力均无明显下降。用戊二醛处理的透性化的固定化细胞催化大豆油转酯化反应,连续重复使用10批次,转化率仍保持在50%以上。(6)将酸法再生的40目活性炭重新用于吸附培养固定化,其细胞吸附量和脂肪酶活力分别为初始载体的92%和91%。