两个沙棘优良无性系组织培养的研究

来源 :西北农林科技大学 西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gipy2a1
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本文试验以“泽良”和“向阳”沙棘的木质化茎段、水培枝茎尖与水培叶片、大田苗叶片等为外植体,以MS、B5和WPM为基本培养基,对沙棘的离体快繁及培养中的多种影响因子进行了较系统的研究,结果表明:(一)无菌系建立木质化休眠茎段污染率高,消毒难彻底,不适合作建立无菌系的外植体;水培茎尖幼嫩,污染率低,是无菌系建立的良好外植体,适宜消毒时间是酒精40 s, HgCl2 3 ~ 5 min。(二)茎尖初代和继代培养1.“泽良”沙棘水培茎尖初代培养基是MS +6-BA 0.5 ~ 1.0 mg/L +IAA 0.5 mg/L,休眠期不同月份差异不明显;继代培养基是1/2 M S + 6-BA 0.5 mg/L +IAA 0.3 mg/L +AC 0.2 %;2.“向阳”沙棘水培茎尖初代培养基是1/2 WPM +6-BA 0.5 mg/L +NAA 0.2 mg/L或WPM +6-BA 0.5 mg/L +NAA 0.2 mg/L,适宜取材时间是11、2、3月份,玻璃化较轻;提高蔗糖和琼脂浓度对茎尖玻璃化改良作用不明显;继代培养基是1/4 MS+ 6-BA 0.5 mg/L +IAA 0.3 mg/L。(三)腋芽诱导1.“泽良”沙棘腋芽增殖培养基选择MS + 6-BA3.0 mg/L +IAA 0.05 mg/L,平均增殖1.53个腋芽,根段增殖培养基是1/2 B5 + 6-BA 7.0 mg/L +NAA 0.05 mg/L,平均分化8.7个不定芽;2.“向阳”沙棘腋芽增殖培养基选择WPM + 6-BA 5.0 mg/L +NAA 0.02 mg/L,平均增殖1.67个腋芽,根段增殖培养基是WPM + 6-BA 3.0 mg/L +NAA 0.05 mg/L+ KT 0.4 mg/L,平均分化2.0个不定芽。(四)叶片培养两品种的水培叶片、大田苗叶片和无菌苗叶片均可诱导愈伤组织或分化不定芽。大田苗叶片的适宜消毒时间是酒精30 ~ 40 s, HgCl2 3 ~ 4 min。1.“泽良”沙棘水培叶片诱导培养选择1/4 MS +6-BA 0.5 mg/L +NAA 0.04 mg/L +KT 0.1 mg/L和1/2 MS +6-BA 0.5 mg/L + NAA 0.04 mg/L +KT 0.3 mg/L,前者不定芽平均诱导率70.2 %,后者平均分化不定芽6.3个;无菌苗叶片用1/3 MS +6-BA 1.0 mg/L +NAA 0.02 mg/L +KT 0.2 mg/L,平均分化不定芽8.3个;大田苗叶片用1/4 MS +6-BA 2.0 mg/L + IBA 0.05 mg/L较好,不定芽诱导率55.8 %。
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