灌木铁线莲AMF群落及AM提高其抗旱特性研究

来源 :内蒙古师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guanhuaicn
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本论文以内蒙古大青山阳坡灌木铁线莲(Clematis fruticosa Turcz)为研究对象,采集其根围土壤及幼根,分离出丛枝菌根真菌(Arbuscular Mycorrhizal Fungi,AMF)孢子,对其进行鉴定,并测定幼根的菌根侵染率。在实验室条件下对灌木铁线莲进行了AMF接种育苗实验,待形成菌根后进行干旱胁迫,测定正常水分和干旱胁迫处理下的生理生化指标,同时对干旱胁迫条件下的灌木铁线莲进行转录组测序,并对差异表达基因进行分析。从生理和分子水平来探讨了接种AMF对灌木铁线莲抗旱性的影响。最终目的了解灌木铁线莲根围土壤AMF群落结构,探明在干旱环境中AM对灌木铁线莲生长和耐旱性的作用机制。研究结果如下:1.通过对所采集的灌木铁线莲幼根染色制片后观察发现,灌木铁线莲是典型的丛枝菌根植物,且菌根侵染率达到90%以上。2.从灌木铁线莲根围土壤中共分离、鉴定出10属的45个AMF种。其中摩西管柄囊霉(Funneliformis mosseae)、根内球囊霉(Rhizophagus intraradices)、蜜色无梗囊霉(Acaulaspora mellea)的重要值均达到50%以上,属于灌木铁线莲根围土壤优势种。此外团集球囊霉(Glomus glomerulatum)、Rhizophagus aggregatus、地表球囊霉(Glomus versiform)的重要值较高,为常见种。3.单因素方差分析结果表明,AMF群落多样性指数种的丰富度、Shannon-Weiner指数、辛普森指数、均匀度随季节变化明显,随海拔变化不明显。AMF多样性指数与土壤理化因子间RDA分析结果表明,土壤因子对AMF物种有影响,但不同土壤因子与AMF物种的相关性存在一定的差异。perMANOVA结果分析发现,与海拔高度相比季节变化对灌木铁线莲根围土壤AMF群落组成的影响较大。4.干旱胁迫下,接种根内球囊霉(R.intraradices)的菌根侵染频度(F%)、丛枝丰度(a%)、丛枝的频度和强度的综合反映(A%)显著高于接种蜜色无梗囊霉(A.mellea)和摩西管柄囊霉(F.mosseae)组(P<0.05),接种A.mellea和F.mosseae两组间没有显著差异。接种根内球囊霉(R.intraradices)处理的菌根化根系中频度和侵染强度的综合反映(m%)显著高于A.mellea,与F.mosseae没有显著差异。侵染强度(M%)在3种接种处理组间没有显著差异。5.干旱胁迫条件下,接种AMF显著降低了灌木铁线莲叶片中的MDA含量,显著提高了抗氧化酶SOD、POD和CAT酶活性(P<0.05)。菌根幼苗的Pro含量显著低于未接种的对照组(CK2)幼苗(P<0.05)。6.干旱胁迫下,与未接种对照组(CK2)相比,接种处理显著提高了灌木铁线莲植株全N含量和对P元素的吸收(P<0.05)。7.对未接种和接种根内球囊霉(R.intraradices)处理组灌木铁线莲幼苗进行转录组测序,利用BLAST搜索将unigenes序列与公共数据库Swiss-Prot、Nr、Pfam、KEGG、KOG和GO进行序列相似性比对。最后进行了差异表达基因(DEGs)分析。依据|log2fold change|≥1和P≤0.001为标准筛选DEGs,总共发现2691个DEGs。与未接种处理相比,在接种处理中,1108个DEGs上调表达,1853个DEGs下调表达。
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