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目的:建立人肝癌细胞SMMC-7721模型,研究与分析敲低AKT或/和HIF-1表达对HIF-1α或/和AKT蛋白表达水平及肝癌细胞增殖、凋亡的影响,探讨AKT在HIF-1α信号通路中的可能作用机制。方法:培养SMMC-7721人肝癌细胞株,随机分为5组:空白对照(BC)组、阴性对照(siRNA-NC)组、HIF-1敲低(HIF1-siRNA)组、AKT敲低(AKT-siRNA)组和HIF-1与AKT共同敲低(HIF1-AKT-siRNA)组。采用RNA干扰技术对细胞进行感染实验,进而构建AKT或/和HIF-1低表达的细胞模型。BC组细胞不予感染慢病毒,siRNA-NC组细胞用阴性对照慢病毒感染,HIF1-siRNA组用HIF-1 siRNA重组慢病毒感染,AKT-siRNA组用AKT siRNA重组慢病毒感染,HIF1-AKT-siRNA组用HIF-1 siRNA和AKT siRNA两种重组慢病毒感染。稳定表达后,用倒置荧光显微镜观察感染效率;细胞增殖抑制率使用CCK-8技术进行上机检测;流式细胞仪检测细胞凋亡水平;并运用Western blot技术测定HIF-1α及AKT蛋白的表达状况。最后根据所得数据的类型和分布情况选用合适的统计学方法进行处理分析。结果:实验组感染效率均达到90%以上。细胞增殖抑制率比较:siRNA-NC组(2.8±1.0)稍高于BC组(0),差异无统计学意义(P>0.05);HIF1-siRNA组(51.0±1.3)、AKT-siRNA组(43.3±1.4)和HIF1-AKT-siRNA组(57.6±1.3)显著高于siRNA-NC组,差异有统计学意义(P<0.05);HIF1-siRNA组高于AKT-siRNA组,差异有统计学意义(P<0.05);HIF1-AKT-siRNA组高于HIF1-siRNA组和AKT-siRNA组,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞凋亡水平比较:siRNA-NC组(11.51±0.25)稍高于BC组(10.79±0.26),差异无统计学意义(P>0.05);HIF1-siRNA组(54.83±.027)、AKT-siRNA组(21.81±0.24)和HIF1-AKT-siRNA组(62.83±0.26)显著高于siRNA-NC组,差异有统计学意义(P<0.05);HIF1-siRNA组高于AKT-siRNA组,差异有统计学意义(P<0.05);HIF1-AKT-siRNA组高于HIF1-siRNA组和AKT-siRNA组,差异有统计学意义(P<0.05)。HIF-1α蛋白表达水平比较:siRNA-NC组(1.14±0.028)稍高于BC组(1.08±0.048),差异无统计学意义(P>0.05);HIF1-siRNA组(0.42±0.021)、AKT-siRNA组(0.92±0.019)和HIF1-AKT-siRNA组(0.27±0.018)显著低于siRNA-NC组,差异有统计学意义(P<0.05);HIF1-siRNA组低于AKT-siRNA组,差异有统计学意义(P<0.05);HIF1-AKT-siRNA组低于HIF1-siRNA组和AKT-siRNA组,差异有统计学意义(P<0.05)。AKT蛋白表达水平比较:siRNA-NC组(1.20±0.021)稍低于BC组(1.23±0.020),差异无统计学意义(P>0.05);HIF1-siRNA组(0.84±0.018)、AKT-siRNA组(0.65±0.018)和HIF1-AKT-siRNA组(0.52±0.025)显著低于siRNA-NC组,差异有统计学意义(P<0.05);HIF1-siRNA组高于AKT-siRNA组,差异有统计学意义(P<0.05);HIF1-AKT-siRNA组低于HIF1-siRNA组和AKT-siRNA组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:敲低HIF-1、AKT表达均可抑制人肝癌细胞系SMMC-7721增殖,促进细胞凋亡。HIF-1可能是肝癌细胞生长的首要因子。AKT与HIF-1之间存在双向的网络调控关系,敲低AKT表达可降低HIF-1α翻译水平,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。相反,敲低HIF-1亦可下调AKT表达水平,进而抑制细胞增殖,促进细胞凋亡;同时敲低AKT和HIF-1可发挥协同作用,抑制肝癌细胞增殖,促进细胞凋亡。