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目的研究高糖刺激条件永生化足细胞脂质蓄积及自噬水平的改变,探讨自噬在高糖诱导足细胞脂质代谢中的作用及分子机制。方法体外培养条件永生化人足细胞,分为正常对照组、高糖刺激组、甘露醇组。油红O染色及细胞脂质含量测定观察高糖对足细胞脂质蓄积的影响;Western Blot免疫印迹法检测脂质代谢相关分子SREBP-1表达水平。体外培养条件永生化人足细胞,分为正常对照组、高糖刺激组、高糖刺激+3-MA(3-Methyladenine,3-MA)干预组、甘露醇组。吖啶橙染色观察各组自噬体的形成,Western Blot免疫印迹法检测自噬相关蛋白beclin-1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达水平,Western Blot免疫印记法检测脂质代谢相关分子SREBP-1表达水平,油红O染色及细胞脂质含量测定观察脂质蓄积程度。结果(1)油红O染色及细胞脂质含量测定显示,正常对照组和甘露醇组足细胞内仅可见极少量脂质蓄积,高糖刺激组足细胞内脂质蓄积明显增多;(2)Western Blot免疫印迹法检测结果显示,高糖刺激导致足细胞内脂质代谢相关分子SREBP-1表达上调(P<0.05);(3)吖啶橙染色结果显示,正常对照组和甘露醇组足细胞内可见少量自噬体的形成,高糖刺激后足细胞内自噬体的形成明显增多,3-MA预处理抑制自噬后足细胞内自噬体的形成较高糖刺激组明显减少;(4)Western Blot免疫印迹法检测结果显示,正常对照组及甘露醇组足细胞自噬相关蛋白beclin-1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达水平较低;高糖刺激可导致足细胞自噬相关蛋白beclin-1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达水平较明显上调(P<0.05);3-MA预处理抑制自噬可明显下调自噬相关蛋白beclin-1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达水平(P<0.05);(5)Western Blot免疫印迹法检测结果显示,3-MA预处理抑制自噬足细胞内脂质代谢相关分子SREBP-1表达水平较高糖刺激组下调(P<0.05);(6)油红O染色及细胞脂质含量测定结果显示,3-MA预处理抑制自噬后足细胞内脂质蓄积较高糖刺激组明显缓解(P<0.05)。结论高糖刺激可导致足细胞脂质蓄积增加,脂质代谢相关分子SREBP-1表达上调;在高糖刺激的基础上抑制自噬可下调足细胞SREBP-1表达,缓解脂质蓄积;即自噬可能通过影响SREBP-1表达参与高糖诱导的足细胞脂质蓄积过程,抑制自噬可有效改善高糖诱导的足细胞脂质蓄积。