目的:观察RNA干扰技术下调食管癌细胞中基因H2AX和STAT1的蛋白表达后,对照射后食管癌细胞周期和细胞核内斑点形成的影响,进而影响食管癌细胞放射敏感性。方法:①采用MTT法和克隆形成实验分别检测了ECA109、ECA109-N、ECA109-H、ECA109-S食管癌细胞细胞增殖和放射敏感性间的差别;②采用流式细胞技术检测4Gy照射后1h、2h、12h、24h和48h,不同的ECA109、ECA109-N、ECA109-H、ECA109-S细胞周期和凋亡的变化;③采用激光共聚焦显微镜检测细胞核内H2AX、STAT1斑点形成的变化情况。结果:①H2AX和STAT1 shRNA转染对食管癌细胞ECA109的增殖活性未见明显影响,p>0.05。②克隆形成实验结果显示ECA109细胞的接种效率为77%,ECA109、ECA109-N、ECA109-H、ECA109-S细胞的D0值分别为2.98Gy、3.02Gy、1.96Gy、2.03Gy,SF2值分别为0.88、0.88、0.59、0.83,H2AX和STAT1 shRNA转染组细胞的放射敏感性明显高于未转染组及空载体转染组（p<0.05）。③照射后1～2h,H2AX和STAT1转染组细胞和未转染组细胞G0/G1期、G₂/M期和S期的百分率未见明显变化。继续观察至12h,发现未照射的ECA109、ECA109-N、ECA109-H、ECA109-S这4组细胞中G0/G1期、G₂/M期和S期的比例均未见明显变化（p>0.05）。而4Gy照射后,ECA109和ECA109-N组G0/G1期比例明显较未照射组降低（p<0.05）,而ECA109-H、ECA109-S照射组G0/G1期比例明显低于相应未照射组（p<0.05）,但高于ECA109、ECA109-N照射组（p<0.05）。4Gy照射后ECA109、ECA109-N组G₂/M期比例明显高于相应未照射组（p<0.05）,而ECA109-H、ECA109-S照射组G₂/M期比例与相应的未照射组比较未见明显差别（p>0.05）。4Gy照射后ECA109、ECA109-N组S期比例明显较未照射组升高（p<0.05）,ECA109-H、ECA109-S照射组S期比例明显高于相应未照射组（p<0.05）,但与ECA109、ECA109-N照射组比较未见明显变化（p>0.05）。各组细胞之间凋亡的变化未见明显差别（p>0.05）。继续观察至24h,发现未照射的ECA109、ECA109-N、ECA109-H、ECA109-S这4组细胞中G₀/G₁期、G₂/M期和S期的比例均未见明显变化（p>0.05）。而4Gy照射后,ECA109和ECA109-N组G₀/G₁期比例明显较未照射组降低（p<0.05）,而ECA109-H和ECA109-S照射组G₀/G₁期比例明显低于相应未照射组（p<0.05）,但高于ECA109、ECA109-N照射组（p<0.05）。4Gy照射后ECA109、ECA109-N组G₂/M期比例明显较未照射组升高（p<0.05）,而ECA109-H、ECA109-S照射组G₂/M期比例明显低于ECA109、ECA109-N照射组（p<0.05）,但仍高于相应未照射组（p<0.05）。4Gy照射后ECA109、ECA109-N、ECA109-H、ECA109-S这4组细胞S期比例未见明显变化（p>0.05）。ECA109、ECA109-N、ECA109-H、ECA109-S未照射组凋亡率未见明显变化（p>0.05）,4Gy照射后ECA109、ECA109-N组凋亡率与未照射组比较未见明显差别（p>0.05）,ECA109-S照射组凋亡率与ECA109、ECA109-N照射组比较未见明显差别（p>0.05）,而ECA109-H照射组凋亡率明显高于ECA109、ECA109-N照射组（p<0.05）。继续观察至48h,发现未照射的ECA109、ECA109-N、ECA109-H、ECA109-S这4组细胞中G₀/G₁期、G₂/M期和S期的比例均未见明显变化（p>0.05）。而4Gy照射后,ECA109和ECA109-N组G₀/G₁期比例明显较未照射组降低（p<0.05）,而ECA109-H、ECA109-S照射组G₀/G₁期比例明显高于ECA109、ECA109-N照射组（p<0.05）。4Gy照射后,ECA109和ECA109-N组G₂/M期比例明显较未照射组升高（p<0.05）,而ECA109-H、ECA109-S照射组G₂/M期比例明显低于ECA109、ECA109-N照射组（p<0.05）。4Gy照射后ECA109、ECA109-N、ECA109-H、ECA109-S这4组细胞S期比例未见明显变化（p>0.05）。ECA109、ECA109-N、ECA109-H、ECA109-S未照射组凋亡率无明显变化,4Gy照射后ECA109、ECA109-N组凋亡率与未照射组比较未见明显差别（p>0.05）,ECA109-H、ECA109-S照射组凋亡率明显高于ECA109、ECA109-N照射组（p<0.05）。④ECA109、ECA109-N、ECA109-H、ECA109-S食管癌细胞接受4Gy照射后30min,ECA109-H核内H2AX斑点的数量明显减少且与对照组比较差别具有统计学意义（p<0.05）;STAT1核内斑点的数量与对照组比较未见明显差别（p>0.05）。结论:H2AX和STAT1 shRNA转染不影响Eca109食管癌细胞的增殖活性,可能是通过调节照射后细胞周期的分布来影响细胞放射敏感性。