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家禽日粮中植物性饲料原料仅30%左右的磷是可供家禽可以直接利用的非植酸磷,为了满足动物生产和产蛋等需求,家禽日粮中必须额外添加无机磷,但是这些添加的磷并不能完全被吸收利用,多余的磷以粪、尿磷的形式排出体外,造成环境污染,提高养殖成本。一方面我国磷资源紧缺,另一方面磷利用不充分、过量排泄导致磷浪费现象严重。因此准确评定动物对磷的需要量、提高日粮植酸磷利用率成为磷营养研究的热点。本试验通过饲养试验测定不同磷水平及钙磷比对蛋鸡生产性能、血液生化指标及骨骼发育情况的影响,应用尤斯灌流技术离体培养蛋鸡小肠测定磷在小肠的吸收转运情况,再结合实时荧光定量测定小肠各部位Na/Pi-IIb基因mRNA的表达量,旨在为产蛋高峰期蛋鸡日粮中适宜磷水平和钙磷比的确定提供试验依据,并研究磷在产蛋高峰期蛋鸡小肠的吸收机理。试验一:不同磷水平和钙磷比对产蛋鸡生产性能、血清生化指标及骨骼性状的影响本试验旨在研究不同磷水平和钙磷比对产蛋鸡生产性能、血清生化指标及骨骼性状的影响。采用2×3因子完全随机分组试验设计,每个因子3个水平,共9个组,每个组5个重复,每个重复9只鸡。日粮两个因子分别为日粮有效磷(AP)水平和钙磷比,3个有效磷水平为0.25%、0.30%和0.35%,钙磷比的3个水平分别为8:1、10:1和12:1。结果表明:当日粮中有效磷水平为0.35%,Ca:AP=10:1时,高产蛋鸡可以获得较高的生产性能、更加优异的蛋品质和胫骨性能。试验二:不同磷水平和pH值对蛋鸡离体小肠磷吸收的影响本研究采用两个单子试验设计,分别探讨培养液磷水平和pH值对蛋鸡离体小肠磷吸收的影响,旨在为应用Ussing chamber评定饲料有效磷时选择适宜培养液磷浓度和pH值提供参考依据。每个因子3个处理,分别为磷水平0.25%、0.30%和0.35%,pH值6.4、7.4和8.4。选取24只30周龄体重相近的罗曼蛋鸡,随机分配到6个处理中,每个处理4个重复,每个重复1只鸡,取十二指肠、空肠和回肠,用Ussing chamber系统培养60min。结果表明:相同磷水平,不同肠段之间磷吸收率并无显著差异(P>0.05),但十二指肠磷吸收率较空肠、回肠稍高。pH 7.4组十二指肠、空肠和回场磷吸收率均显著高于pH6.4和pH8.4组(P<0.05),且各试验组十二指肠电阻显著高于空肠和回肠电阻,空肠和回肠之间电阻差异均不显著。当pH水平为6.4-8.4时,随着pH的增加,各肠段电阻均表现为先增加后降低,pH7.4时十二指肠电阻显著高于6.4和8.4组,pH6.4和8.4组差异不显著;空肠和回肠与十二指肠结果规律相同。各试验组十二指肠电阻均高于空肠和回肠。以蛋鸡为动物模型,用Ussing chamber技术评定饲料有效磷时,培养液适宜pH为7.4;有效磷含量以0.3%左右为宜。试验三:不同磷水平和钙磷比对蛋鸡小肠Na/Pi-IIb基因mRNA表达量的影响研究不同磷水平和钙磷比对高产蛋鸡小肠Na/Pi-IIb基因mRNA表达量的影响。以试验一中蛋鸡肠道为试验材料,采用RT-PCR对各肠段Na/Pi-IIb mRNA表达量进行测定。结果表明:(1)日粮中AP水平和Ca:AP对蛋鸡小肠Na/Pi-IIb mRNA表达量具有显著影响,0.25%AP组日粮肠道中Na/Pi-IIb mRNA表达量高于0.30%和0.35%组。(2)十二指肠和空肠Na/Pi-IIb mRNA表达量随着Ca:AP的提高而增加。小肠各肠段Na/Pi-IIb mRNA表达量为十二指肠>空肠>回场。综上所述可以得出:(1)以蛋鸡为动物模型用Ussing chamber技术评定饲料有效磷时,培养液适宜pH为7.4,有效磷含量以0.3%左右为宜。(2)日粮中AP水平0.35%,C:AP=10:1时高产蛋鸡可以获得较高的生产性能,优异的蛋品质及胫骨性能。(3)0.25%AP组日粮肠道中Na/Pi-IIb mRNA表达量高于0.30%和0.35%组。十二指肠和空肠Na/Pi-IIb mRNA表达量随着Ca:AP的提高而增加;小肠各肠段Na/Pi-IIbmRNA表达量为十二指肠>空肠>回肠。