基于皮片技术研究表皮内朗格汉斯细胞对过敏原摄取及诱导免疫炎症的研究

来源 :北京协和医学院中国医学科学院 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhxg
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目的:①通过分析临床病例来探讨嗜酸性粒细胞(EO)和总IgE在特应性皮炎(AD)患儿中的水平差异,研究两者与疾病严重程度之间的关系,并分析其对疾病的诊断价值。②完善自皮片分离细胞技术,获得质量较高的LCs,明确表皮内LCs上Langerin与多种变应原多糖抗原的结合能力,以及其参与LCs对多糖抗原摄取和递呈的过程和诱导T细胞分化过程中所起的作用。  方法:①收集2016年1月至2016年8月期间中国医学科学院皮肤病医院门诊收治的154例AD患儿为研究对象,并选取同期的317例体检的健康幼儿和儿童为对照,设为AD组和对照组。采用SYSMEX SE-9500全自动血细胞分析仪和ImmunoCAP过敏原检测系统分别测定两组血液中EO、总IgE水平,应用SPSS20.0软件分析两组EO、总IgE水平差异的统计学意义;分析AD组EO、IgE与SCORAD评分的相关性;绘制AD组和对照组EO、总IgE的ROC曲线,计算曲线下面积。②在局部微环境下(TSLP)进行LCs成熟前后对数种多糖抗原的免疫识别的研究;比较皮肤爬片技术和单悬液技术的细胞生存率和Langerin表达水平的差异;进行在上述活化状态下的LCs对初始T细胞极化的研究。以上指标均以P<0.05为差异有统计学意义。  结果:①AD组和对照组的EO总数分别为(0.40±0.03)×109、(0.13±0.01)×109;两组血清中总IgE水平分别为(684.4±95.22)、(44.24±1.37)IU/ml,AD组EO、总IgE水平较对照组明显升高(P<0.001);EO、总IgE与SCORAD均呈正向相关(P<0.001,P<0.01);两组EO、总IgE水平的ROC曲线下面积为0.76,0.79(P<0.001)。②表皮活细胞群中CD207与CD1a双阳性率为(4.6±0.7)%,符合LCs在表皮中的比例3~5%;与Blank相比,加入derp,TSLP+derp,OVA,α-gal刺激物后均出现CD80,CD83,CD86,HLA-DR的表达水平呈不同程度的上升现象(P<0.05);同时证明爬片技术比单悬液技术细胞成活率高,分别为(94.6±14.2)%和(76.3±13.1)%(P<0.01),并且CD207阳性率也明显增多,分别为(16.8±4.7)%和(12.1±3.5)%(P<0.01);derp组和Blank组的细胞上清液中IL-4浓度为(368.4±73.1)pg/ml和(195.3±53.7)pg/ml,IFN-γ浓度分别为(278.6±79.2)pg/ml和(631.0±103.5)pg/ml;与Blank组相比,derp组上清中IL-4浓度显著升高(P<0.01),而IFN-γ浓度则是降低趋势(P<0.005)。  结论:①AD病人EO、总IgE水平高于正常人,对AD病情严重程度尤其中重度具有一定的提示作用,EO、总IgE可以做为一个AD临床病情评估指标。②皮肤爬片技术优于单悬液技术。LCs细胞上的Langerin可参与变应原多糖抗原的识别、摄取和递呈,LCs在诱导T细胞分化过程中起到关键作用。
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