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本文以粤黄鸡种母鸡为研究对象，研究了催乳素(PRL)和Leptin受体对卵泡发育的影响，及鸡颗粒细胞和膜细胞的体外培养的建立。
⑴研究了对饲养在长光照(16L：8D)和短光照(10L：14D)下的粤黄种母鸡免疫PRL重组融合蛋白后，对其产蛋和卵泡发育的影响。结果显示免疫组体内产生了极显著高于对照组的抗体(P<0.01)，且出现了免疫组的产蛋率显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)低于免疫牛血清白蛋白(BSA)的对照组鸡。通过饲喂颜料测量颜料直径同卵黄直径的比值，看到在大白向小黄或小黄向大黄晋级过程中，短光照下免疫组的比值显著高于对照组(P<0.05)。表明免疫PRL推迟了小卵泡的发育速度或减缓了小黄卵泡被征集进入大黄卵泡的速度。
⑵研究了饲养在变化光照(前6周光照时间在12小时左右，第6周开始延长光照至16h，光照强度平均为10.061ux)下的粤黄种母鸡免疫PRL重组蛋白，然后观察对卵泡发育的影响。结果显示免疫组鸡体内产生的抗体水平极显著高于对照组(P<0.01)；免疫组产蛋率极显著低于对照组(P<0.01)；通过颜料的沉积情况观察免疫PR后对卵泡发育速度的影响结果表明，在F3发育为F2时，免疫组颜料直径同卵黄的比值极显著高于对照组(P<0.01)，在大白征集为小黄或小黄晋级为大黄时，免疫组颜料直径同卵黄的比值显著高于对照组(P<0.05)。在实验第82天屠宰，免疫PR组大白卵泡的数目显著高于对照组(P<0.05)；利用荧光定量PCR检测卵泡颗粒层和膜层细胞中基因mRNA相对表达结果显示：FSHR在免疫组FIG(F1 Granulosa layer)、F2T(F2 Theca layer)、F3G(F3 Granulosa layer)、F3T(F3 Thecalayer)中显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。StAR在免疫组的FIG、F3G中的相对表达显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。PRLR在免疫组的FIT(F1 Theca layer)、F3G中的相对表达显著高于对照组(P<0.05)。LHR在免疫组中的FIT、F3G的相对表达显著高于对照组(P<0.05)。所有基因在F4G(F4 granulosa layer)、F4T(F4 theca layer)、F5G(F5 granulosa layer)、F5T(F5 theca layer)中的相对表达量无明显差异(P>0.05)。P450scc主要在颗粒层表达。PRL可能通过对StAR、LHR、PRLR基因的上调来促进卵泡的发育。
⑶进行了颗粒细胞(Granulosa cell，Gc)和膜细胞(Theca cell，Tc)体外培养的探索，成功分离和培养了颗粒细胞和膜细胞。在单独加入不同浓度的PRL后，对颗粒细胞的增殖无影响(P>0.05)。但对膜细胞的增殖部分表现出抑制效应，1和10ng/mL的PRL极显著降低了F3膜细胞(F3T)的增值(P<0.01)；0.1和1 ng/mL的PRL极显著降低了F4膜细胞(F4T)的增值(P<0.01)，10ng/mL的PRL显著降低了F4膜细胞(F4T)的增值(P<0.05)。这些结果说明，PRL将降低卵泡膜细胞的增殖和功能。
⑷对粤黄鸡免疫Leptin受体胞外区前段(N—端)和后段观察其对卵泡发育的影响。结果显示，无论是免疫Leptin受体N—端还是后段都出现了极显著降低产蛋率的情况(P<0.01)，此时屠宰鸡揭示免疫后导致小卵泡出现大量闭锁，严重时促进部分甚至全部大卵泡闭锁。表明Leptin直接影响卵泡的发育能力与闭锁。对F1—F5卵泡颗粒层和膜层上基因进行了荧光定量PCR，结果显示：FSHR在免疫Leptin受体后段组的F5G出现基因下调，相对表达量显著低于对照组(P<0.05)。LHR基因在免疫Leptin受体N—端组的F3G的相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。StAR在免疫Leptin受体N—端组的F3G的相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。bcl2在免疫Leptin受体N—端组的FIG、F2G、F3G和免疫Leptin受体后段组的FIG的相对表达量显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)，而在免疫Leptin受体N—端组和免疫Leptin受体后段组的F4T、F5G的相对表达量显著或极显著低于对照组(P<0.05或P<0.01)。IGF1在免疫Leptin受体N—端组的FIG、F2G、F3G和免疫Leptin受体后段组的FIG、F4T的相对表达量显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)，而在免疫Leptin受体N—端组的F2T和免疫Leptin受体后段组的F2T、F4T的相对表达量显著或极显著低于对照组(P<0.05或P<0.01)。其余的基因在免疫组和对照组的相对表达量无显著性差异(P>0.05)。这些表明Leptin通过对卵泡上FSHR、LHR、StAR、bcl2和IGF1基因的上调，则卵泡能继续发育发生排卵，而如果这些基因下调决定卵泡上颗粒细胞或膜细胞发生凋亡，卵泡将闭锁。