【摘 要】
：
L-乳酸脱氢酶(L-Lactate Dehydrogenase,L-LDH)是发酵生产L-乳酸中催化丙酮酸转化成L-乳酸的关键酶。本文以干酪乳杆菌G-02(Lactobacillus casei G-02)基因组DNA为模板,克隆得到L-LDH基因(ldhL),经序列分析后将其连接到表达载体pET-28a(+)上,构建成重组质粒pET-ldhL,并将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,实现ldh
论文部分内容阅读
L-乳酸脱氢酶(L-Lactate Dehydrogenase,L-LDH)是发酵生产L-乳酸中催化丙酮酸转化成L-乳酸的关键酶。本文以干酪乳杆菌G-02(Lactobacillus casei G-02)基因组DNA为模板,克隆得到L-LDH基因(ldhL),经序列分析后将其连接到表达载体pET-28a(+)上,构建成重组质粒pET-ldhL,并将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,实现ldhL基因的表达,30℃加入终浓度0.4 mmol/L的IPTG诱导表达,采用Ni-NTA凝胶填充层析柱纯化
其他文献
TS-1是一种具有MFI结构的钛硅分子筛,由于过渡金属Ti的引入使其具有优越的选择氧化反应性能。钛硅分子筛和稀双氧水组成的催化体系被广泛地应用于选择氧化领域,具有优良的低温选择氧化反应性能,而且避免了氧化过程工艺复杂和环境污染的问题,有传统氧化体系无可比拟的节能、经济和环境友好等优点。经典法合成TS-1需使用价格昂贵的四丙基氢氧化铵为模板剂,廉价法则采用四丙基溴化铵代替四丙基氢氧化铵,但是这两种体
本文使用有机碱的稀溶液对挤条成型的小晶粒钛硅分子筛TS-1进行改性,改性方法为：将10g挤条成型的TS-1与100mL浓度为0.06mol/L的有机碱溶液加入带聚四氟乙烯内衬的不锈钢晶化釜中,在170℃下静置改性48h后,取出固体洗涤、干燥,并在540℃下焙烧6h。在固定床反应器中分别考察了四甲基氢氧化铵(TMAOH),四乙基氢氧化铵(TEAOH),四丙基氢氧化铵(TPAOH).乙胺(EA)及二乙
环氧丙烷是一种非常重要的有机化工原料,丙烯选择性氧化制备环氧丙烷是化学工业中的重要反应。环氧丙烷的生产方法主要有氯醇法和有机过氧化物氧化法等,这些传统的生产方法高能耗,高污染,不符合绿色化学的宗旨和清洁生产的目标。直接以分子氧为氧化剂催化丙烯环氧化生成环氧丙烷是目前催化领域中最具挑战性的课题之一。本文利用钛硅分子筛TS-1为载体,以尿素为沉淀剂通过沉积-沉淀法制备了用于催化丙烯直接气相环氧化制环氧
最近几年来BODIPY荧光染料得到了迅猛发展,因其具有较高的摩尔消光系数、高的荧光量子效率以及稳定的光谱性质等优点而倍受关注。本文创造性的设计合成了一种基于6-羟基吲哚类结构的新型BODIPY荧光染料—BODIPY-OH,实验得知其具有独特的光谱性质。同时对BODIPY-OH所具有的酚羟基加以修饰可制得一系列高选择性的荧光探针,文中选取了由BODIPY-OH与2-毗啶甲酸通过酯键缩合得到的Cu2+
维生素C作为天然抗氧化剂备受青睐,但不具有脂溶性极大地限制了其应用。随着两步发酵生产技术的成熟,全球维生素C产能过剩危机严重。因此,维生素C改性对扩展其使用范围,增加其附加值,缓解产能过剩有重要的现实意义。对维生素C改性,生物法与化学法相比更具优势,但是目前生物酶制剂价格昂贵,制作繁琐。本论文对发酵法生产高效低成本的新型固定化生物催化剂—脂肪酶全细胞催化剂及其催化合成L-抗坏血酸脂肪酸酯的工艺路线
论文以一株分泌表达猪α干扰素(pIFN-α)的重组毕赤酵母(Pichia pastoris)为模式菌株,在10 L发酵罐下开展了P.pastoris高密度发酵生产pIFN-α的研究,以代谢酶学的方法为手段,重点考察了不同诱导条件、特别是甲醇/山梨醇共混流加诱导对pIFN-α发酵性能、代谢途径(包括能量代谢)和代谢分布、能量再生和效率、耗氧能力以及中间代谢产物的影响。主要研究结果总结如下:将诱导温度
本文应用代谢控制发酵的基本原理,对黑曲霉PG-1(Aspergillus niger PG-1)进行逐级诱变处理,得到一株高产菌株A.niger GJ-2,并进行了发酵条件优化、混菌发酵、果胶酶的纯化和酶学性质的研究,最后对果胶酶的应用进行了研究,主要结论如下:出发菌株A.niger PG-1的果胶酶产量为312.5 U/mL,利用紫外和亚硝基胍对其进行诱变处理,得到一株高产菌株A.niger G
产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)是本研究室从自然界中分离筛选得到的一株性能优良的高产甘油菌株,已成功应用于工业化生产。由于对其生理生化特性、遗传背景及代谢仍缺乏系统性的认识,因而阻碍了对产甘油假丝酵母的进一步研究。本研究立足于此,对C. glycerinogenes的形态学、生理生化特性和18S rDNA进行了较全面的考察,并对其利用不同碳源发酵不同时期的代谢流分布进
植物油脂是一种可再生资源,目前其催化环氧化产物已被广泛应用于环保增塑剂领域。与传统的金属环氧催化剂相比,非金属糖类衍生物作为植物油环氧化反应的催化剂,具有原料廉价易得、制备简单、反应条件温和、不引入过渡金属元素等优点,更加符合清洁低碳生产的趋势。本文设计了三种非金属羰基催化剂,并采用两步法合成。使用FT-IR、~1H NMR分别对所合成的三种催化剂进行了表征,验证了其官能团结构的生成。成功将上述非
天然色素是一类来源广泛、安全性高、色彩色调自然、对环境友好同时可能兼具某些营养和药理功效的生物活性物质。利用微生物发酵生产天然色素,可以打破来源于动植物的天然色素因原材料不足、价格过高而应用受限的瓶颈。论文从一株产天然色素的镰刀菌(Fusarium sp. B158)出发,研究了该菌株产天然色素的液态发酵条件、天然色素的提取及分离纯化方法、天然色素的性质和结构及其工业应用潜能等。主要研究结果如下: