【摘 要】
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目的:干扰素γ(Interferon-γ, IFN-γ)是一种CD4+ T细胞源性免疫调节细胞因子,通过作用于巨噬细胞、泡沫细胞和其他血管细胞而对动脉粥样硬化发挥其病理学作用。本课题组以
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目的:干扰素γ(Interferon-γ, IFN-γ)是一种CD4+ T细胞源性免疫调节细胞因子,通过作用于巨噬细胞、泡沫细胞和其他血管细胞而对动脉粥样硬化发挥其病理学作用。本课题组以前的研究发现,IFN-γ能减少THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ATP-binding cassette transporter A1, ABCA1)表达及胆固醇流出。但是对其调节机制的研究至今未见报道。本研究针对这一问题,以THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象,采用多种实验方法,探讨IFN-γ减少ABCA1表达和胆固醇流出的可能机制。方法: THP-1单核细胞经PMA诱导贴壁后,加入oxLDL诱导其转化为泡沫细胞,经各种因素处理后,运用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出,高效液相色谱分析细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量,用实时荧光定量PCR、逆转录-聚合酶链反应和Western印迹分析法分别检测ABCA1和肝X受体α(liver X receptorα, LXRα)mRNA与蛋白质的水平,并采用Western印迹分析法检测STAT1磷酸化及细胞核内STAT1水平。结果:实验结果显示,IFN-γ能在基因和蛋白水平减少ABCA1和LXRα的表达,减少细胞内胆固醇流出并增加细胞内胆固醇含量。LXRα特异性激动剂22(R)-羟基胆固醇(22(R)-Hch)能减弱IFN-γ下调ABCA1的作用,而LXRα特异性抑制剂4,4-二异硫氰酸二丙乙烯2,2-二磺酸(DIDS)能增强IFN-γ下调ABCA1的作用。IFN-γ能引起STAT1发生磷酸化形成pSTAT1,并增加核内STAT1水平。双面神激酶(Janus kinase,JAK)抑制剂AG-490能减少核内STAT1表达,降低IFN-γ下调LXRαmRNA表达的作用。AG-490也能减弱IFN-γ下调ABCA1 mRNA与蛋白质水平并减少细胞内胆固醇流出。结论:IFN-γ通过JAK-STAT1信号转导途径的下调LXRα水平,从而减少THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内ABCA1表达和胆固醇流出。
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