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安吉白茶是一种能稳定遗传的白化突变茶树品种。该茶树品种在春季新长出的嫩芽为浅绿色,而展开叶先呈微绿色,随后逐渐变成乳白色,白色叶片持续一段时间后,在春茶后期叶片又开始复绿,直到完全恢复成正常绿色。随着茶树叶片颜色的变化,安吉白茶中氨基酸含量也不断变化,其中最白期含量最高,超过6%,是普通绿茶品种的2倍以上。本研究采用cDNA-AFLP技术分离了安吉白茶阶段性返白过程中差异表达的基因,并采用SMART RACE技术全长克隆了部分可能与安吉白茶白化或氨基酸富集相关的基因,旨在研究安吉白茶白化突变以及氨基酸富集的分子机理。这将有助于安吉白茶的产业发展及其功能成分的开发利用。本研究取得的主要研究结果如下。1.采用cDNA-AFLP技术,对安吉白茶返白前期、白化期及完全复绿期的基因表达进行了分析。结果显示,安吉白茶阶段性返白过程中,差异表达基因呈现4种不同的表达模式：(1)白化期基因表达上调；(2)白化期基因表达下调；(3)在返白前期、白化期和完全复绿期间表达量逐渐递增；(4)在返白前期、白化期和完全复绿期间表达量逐渐递减。选取其中127个比较典型的差异片段,进行了克隆测序。通过BlastX比对发现,有60个差异片段在GeneBank中找到了同源序列,其中主要包括：转录因子,泛素化相关蛋白基因,叶绿素生物发生相关蛋白基因,信号转导相关基因,抗逆相关基因,细胞周期相关基因,物质和能量代谢相关基因。另外67个差异片段没有找到同源序列或同源性很低。2.采用实时荧光定量PCR技术,研究了7个可能与安吉白茶白化突变及氨基酸富集相关的基因在阶段性返白6个不同时期基因表达的变化情况。研究发现,PPR基因、HD-Zip转录因子、WRKY转录因子、泛素连接酶、泛素蛋白基因、泛素碳末端水解酶基因及逆转座子均在返白过程中呈现上调表达,而在复绿过程中呈现下调表达。该研究结果与cDNA-AFLP的分析结果一致。3.采用SMART-RACE技术克隆了安吉白茶PPR基因、ULE基因、UB基因、UCH基因的cDNA全长序列。序列分析表明,安吉白茶PPR基因cDNA全长为2063bp,共编码605个氨基酸,PPR基因氨基酸序列与葡萄、苜蓿、大豆和拟南芥的相似性分别为73%、68%、66%和57%。安吉白茶ULE基因cDNA全长为1839bp,共编码384个氨基酸,氨基酸序列与葡萄、大豆、拟南芥和短柄草属的相似性分别为72%、63%、63%和60%。安吉白茶UB基因cDNA全长为803bp,共编码98个氨基酸,氨基酸序列与豌豆、烟草、葡萄、大豆和拟南芥的同源性非常高,相似性分别为95%、93%、92%、91%和89%。安吉白茶UCH基因cDNA全长为1878bp,共编码461个氨基酸,氨基酸序列与拟南芥的相似性为59%。