杂草会给农业生产带来巨大的损失,目前使用最多的除草方式还是使用化学除草剂,但人们已经开始意识到使用化学除草剂带来的环境污染、杂草产生耐药性等问题,而微生物除草剂以其安全、环保等优点成为研究的热点。目前微生物除草剂正处于发展阶段,实现商品化的成果较少。本实验主要通过对具有除草活性真菌的分离、筛选、鉴定、发酵工艺优化及对发酵液进行复配,以得到能对多种杂草起到良好防除效果的微生物除草剂。从土壤和患病植物中分离得到19种真菌,经过除草活性检验,发现Z-5对马唐,苘麻,鹅头稗的抑制效果较好,Z-6对马唐,稗草,马齿苋的抑制效果较好。经过形态学和ITS序列的鉴定初步判断Z-5属于塔宾曲霉属,Z-6属于黑曲霉属。对Z-5和Z-6进行液体发酵工艺优化,结果显示Z-5的最佳培养基配方为马铃薯浸出液1000 m L,淀粉3.08%,硝酸钾0.31%,硫酸镁0.15%,最佳液体发酵条件为,培养温度30.3℃,初始p H为5,装液量100 m L(250 m L锥形瓶),接种量8%,转数150 r/min,种龄48 h;Z-6的最佳培养基配方为1000 m L马铃薯浸出液,淀粉3.11%,硫酸铵0.21%,磷酸氢二钾0.1%,最佳液体发酵条件为,培养温度27.8℃,初始p H为5,装液量100 m L(250 m L锥形瓶),接种量9%,转数140 r/min,种龄36 h。对除草真菌Z-5和Z-6的发酵液按照1:1的比例复配后,进行杂草盆栽防除应用实验,发现最佳的处理方法是叶面喷施,使用总孢子数为43105孢子/m L浓度的复合微生物菌剂即可对马唐,苘麻,鹅头稗和马齿苋达到80%的防除效果。用复配后的复合微生物菌剂进行安全性实验,结果表明复合微生物菌剂对小麦的生长没有影响,对蚯蚓、斑马鱼和小球藻安全。对土壤使用复合微生物菌剂处理后,土壤中细菌、真菌和放线菌的数量会有显著的增加。经过实验发现,在喷洒了复合微生物菌剂后,杂草体内的叶绿素含量会迅速下降,而后丙二醛和超氧阴离子的含量开始上升,过氧化保护酶系:超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)的活性呈现先增加后迅速下降的趋势,持续增加的丙二醛(MDA)和活性氧可能会对杂草的膜脂和蛋白质造成严重破坏,这也可能是可溶性蛋白含量大幅下降的原因,随着杂草膜脂和蛋白质破坏程度的加重,最终导致杂草死亡。