【摘 要】
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该研究通过PCR方法分别克隆了番茄果实特异表达的E8基因启动子核心片断(1.1kb)和完整片段(2.3kb),相应的称为1.1E8启动子和2.3E8启动子.通过pBluescript Ⅱ SK+/-和pBI121载
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该研究通过PCR方法分别克隆了番茄果实特异表达的E8基因启动子核心片断(1.1kb)和完整片段(2.3kb),相应的称为1.1E8启动子和2.3E8启动子.通过pBluescript Ⅱ SK+/-和pBI121载体,及该实验室已有的含HBsAg(Hepatitis B Surface Antegen)基因的中间载体pT-S和含带PreS2序列的HBsAg基因的植物表达载体pBI-1.1E8-S2S,最终构建了两个植物表达载体:一个是pBI-35S-S2S,含有在35S启动子下的带PreS2序列的乙肝病毒表面抗原S基因;另一个是pBI-1.E8-S,含有1.1E8启动子控制下的S基因.将以上两个植物表达载体通过冻融法导入根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens LBA4404)中,利用农杆菌介导法将位于以上两个载体的T-DNA左右边界序列间的"35S启动子+PreS2+S基因"和"1.1E8启动子+S基因"分别转化到烟草中,获得两种转基因烟草植株.通过PCR和Southern hybridization证实两个目的基因已经分别整合进入烟草的基因组中.ELISA检测结果表明PreS2+S基因在烟草中获得了表达,而1.1E8启动子控制下的S基因在烟草的花、叶片、种子中均无表达.
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