【摘 要】
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功能酶制品在工业生产被大量应用,产生了酶制剂品种单一、活力较低等问题,因此,寻找生产多种功能酶的菌种资源有利于酶制剂工业增加更多的选择机会,有进一步发展的可能。各类研究学者对于菌种资源的挖掘已有一定进展,而对于特殊生境的菌种资源研究较少。因此为更高效的挖掘新的菌种资源,本研究选取具有典型严酷低温环境的漠河周边的土壤中适应性和生命力更强,在极端环境下仍可正常生长并且产生活性物质的放线菌菌种资源进行研
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功能酶制品在工业生产被大量应用,产生了酶制剂品种单一、活力较低等问题,因此,寻找生产多种功能酶的菌种资源有利于酶制剂工业增加更多的选择机会,有进一步发展的可能。各类研究学者对于菌种资源的挖掘已有一定进展,而对于特殊生境的菌种资源研究较少。因此为更高效的挖掘新的菌种资源,本研究选取具有典型严酷低温环境的漠河周边的土壤中适应性和生命力更强,在极端环境下仍可正常生长并且产生活性物质的放线菌菌种资源进行研究,发掘菌株信息,提供研究依据及菌种研究资源。通过分离与筛选漠河土壤的放线菌,并且进行形态学观察、分子生物学鉴定及酶活分析,可以增加对于漠河表层土壤中可培养放线菌深层了解。在筛选过程中,有一菌株16S r RNA的序列相似性低于98.65%,疑似放线菌新种,后续通过多相分类鉴定分析鉴定。本实验研究结果如下所述:首先利用土壤分离、初筛、复筛、观察菌株等实验方法,筛选得到27株放线菌,通过形态学观察及16S r RNA鉴定确定27株放线菌种属,其中包含节杆菌属（Arthrobacter）、红球菌属（Rhodococcus）、芽孢杆菌（Bacillus）等菌属,另外一株节杆菌经16S r RNA鉴定为新种。其次对27株放线菌相关水解酶活进行初步探究,从所测菌株中筛选到26株放线菌（占筛选菌株总数的96.3%）在至少2种功能酶活性检测中显示阳性,只有1株放线菌（占筛选菌株总数的3.7%）无功能酶活性。接着从已测的8种水解酶活中选择蛋白酶进一步深入研究,通过十字交叉法初步确定蛋白酶高产菌株,后续对其进行蛋白酶活力的单因素实验,确定四株放线菌产酶的最适培养基、最适温度、最适p H以及最适盐度。最后本试验通过16S rRNA测序确定27株放线菌中有一株菌株FX-3序列相似性低于98.65%,经表型、化学性质、基因型等多相分类鉴定,结果得出FX-3的细胞水解糖成分包括葡萄糖和半乳糖,醌类物质主含量为MK-9（H2）,脂肪酸主含量为anteiso-C15:0,胞壁肽聚糖为赖氨酸型（A3α）。这些特征符合节杆菌属特征,最终确定这株放线菌属于节杆菌属的一个新种。
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