研究背景及目的：从全球范围来看，结核至今为止仍然是传染病中发病率和死亡率最高的疾病之一，据估计每年新发病例约900,0000人，每年约有200,0000人死于结核病。结核病是由结核杆菌引起的一种人畜共患传染病，是单一致病菌感染导致死亡率最高的感染性疾病。我国是结核病高负担国家之一，2000年全国结核病流行病学抽样调查资料显示：全年龄组结核感染率为44.5%，活动性结核患者451万，每年死亡人数达13万，结核病死亡占各种传染病，寄生虫病死亡的65.1%，几乎为其它各种传染病、寄生虫病死亡总和的2倍。由于人类免疫缺陷病毒的广泛传播及耐药结核分枝杆菌的日益增多，使得这一古老的疾病再次引起人们的广泛关注。结核病成为危害人类健康的重要传染病之一。导致全球结核病疫情控制不佳的部分原因在于结核病诊断方面研究进展缓慢。一百多年来，结核菌素皮肤试验（TST）一直是用来诊断潜伏性结核感染（LTBI）的主要方法，但是由于TST不能区分陈旧感染与新近感染，与卡介苗及环境非结核分支杆菌之间存在交叉免疫从而导致假阳性，在免疫抑制人群中反应存在假阴性，在判读过程中存在误差，这些原因导致TST在临床中的诊断应用方面大大受限。在此背景下，国内外学者研制出一种新的诊断潜伏性结核感染的检测方法：γ-干扰素释放试验（IGRA），由于其不受卡介苗接种及环境分支杆菌等因素的影响，已经广泛应用于欧美地区和日本等低疫情国家。但是在中国这样一个高结核疫情国家，其应用价值缺乏详尽的相关资料，需要进一步的评价。在潜伏性结核感染方面，随着对IGRA应用经验的增加，IGRA已经被部分国家推荐作为诊断潜伏性结核感染的国家指导方针的一个组成部分。但是在我国是否也同样适用尚不得而知。在临床治疗过程方面，对于在不同类别的疾病环境中，比如在潜伏性结核感染或者成年活动性结核病患者中，一系列IGRA显示在对治疗过程的反应中出现各种不同的结果：一些研究显示在治疗后γ-干扰素（IFN-γ）释放水平下降，而另一些研究则显示治疗后增加或保持不变，至今为止缺乏合理的机制能够解释。在诊断方面尽管IGRA对于潜伏性结核感染的诊断价值已经得到广泛证实，但是这个技术在活动性结核病包括结核性胸膜炎的诊断中还没有被证实。这些问题都需要我们进一步的研究与评价。研究内容：1.IGRA在一起结核爆发事件筛查中的作用评价及与TST的比较通过一起学校结核病爆发事件，把与原发病例密切接触的520个学生按照暴露水平分为6个等级，分别用不同的TST截断值及IGRA与暴露等级进行条件Logistic回归分析，比较二者在潜伏性结核感染中的诊断价值。以发病病例为因变量，其他变量为协变量进行二分类Logistic回归分析，寻找结核病发病高危因素，并通过筛查结果，探索学校结核病爆发事件防控策略。2.IGRA在潜伏性结核感染诊断中的作用评价及与TST净增值的比较在结核爆发事件中，根据爆发前TST截断值把研究对象分为三组；TST＜5mm,5≤TST＜10mm, TST≥10mm，并在三组中比较IGRA和TST净增值（increase in induration of TST,缩写为ITST；TST≥10mm定义为TST阳转即TSTconversion，简称为TSTC）与高中低三个暴露等级的相关性和诊断价值。比较IGRA与TSTC之间的符合度，以及通过二者之间的不同组合结果评估其与暴露水平之间的关系。3. IGRA在结核化疗疗效判定中的作用研究在结核爆发事件中，对发病者、接受药物预防性治疗的密切接触者、未接受药物预防性治疗的密切接触者三组研究对象在半年后进行第二次IGRA检测，分别在组间及组内对IGRA、IFN-γ水平结果进行比较，以探索IGRA在临床中疗效判定及免疫机制方面的作用。4. IGRA在结核性胸膜炎诊断中的作用研究对所有患者进行外周血，胸水，胸水分离细胞IGRA检测，结果与单纯检测胸水中IFN-γ水平进行比较。同时还对结核性胸膜炎，恶性胸腔积液，其他原因所致的胸腔积液三个组别进行IFN-γ，ADA, TB-Tb检测并进行ROC曲线分析比较。研究结果：1. IGRA在一起结核爆发事件筛查中的作用评价及与TST的比较IGRA与TST之间的相关性较差(kappa：0.182-0.290)。IGRA+与暴露水平密切相关，IGRA+与暴露水平是结核发病的高风险因子。无论是单独用IGRA还是单独用TST都不能检出所有的结核病例。然而，如果在最高暴露等级中选择全部接触者并联合其他暴露等级中IGRA+接触者，检出19/20(95%)的结核病例。2. IGRA在潜伏性结核感染诊断中的作用评价及与TST净增值的比较爆发后三组的TST净增值分别为8.22±5.94mm、6.78±4.57mm、3.68±3.42mm。三组的TST阳转与IGRA+的kappa值分别为0.541、0.219和0.045。在爆发前TST<5mm组，TST阳转率与暴露水平密切相关（P<0.05）;在其它组均未表现出相关性（P>0.05）。而IGRA+与暴露水平密切相关（P<0.05）。IGRA+/TSTC+、IGRA+/TSTC-的检出率随着暴露等级的降低而降低（P<0.05）,IGRA-/TSTC-的检出率随着暴露等级的降低而增加（P<0.05）。3．IGRA在结核化疗疗效判定中的作用研究随访半年后发病者、接受药物预防性治疗的密切接触者组、未接受药物预防性治疗的密切接触者三组中IFN-γ总体水平的均值都明显降低，统计学有显著差异性（P<0.05）；但是三组之间在随访前后无论是IFN-γ水平还是IGRA阴转率均无显著差异性（P>0.05），提示药物治疗并不是导致IFN-γ水平变化的主要原因。TST在三组中多数发生阳转，但是部分研究对象阴转。98个IGRA+/TST+未接受抗结核治疗的接触者中，45例IGRA+发生阴转（45.92%），14例TST+发生阴转（14.29%）。59例IGRA+/TST-未接受药物预防性治疗者中，31例IGRA+发生阴转（52.54%），同时有31例TST-者发生阳转（52.54%）。4. IGRA在结核性胸膜炎诊断中的作用研究以临床诊断为标准，采用ROC曲线分析求得结核性胸膜炎中IFN-γ的最佳截断值为5IU/ml，当IFN-γ水平≥5IU/ml为阳性，反之为阴性。在结核性胸膜炎患者中对外周血、胸水及胸水分离细胞的IGRA结果进行比较后发现，这些样本的检测结果之间没有差异性，而且上述指标与单纯检测胸水中IFN-γ阳性率之间比较也没有差异性（P>0.05）。在所有检测中，单纯检测胸水中IFN-γ水平的灵敏度及符合度最高。将患者IFN-γ水平及ADA、TB-Ab进行ROC曲线分析比较后发现，各个指标中，单纯检测胸水中IFN-γ水平在ROC曲线下面积，敏感度，特异度及阳性、阴性预测值方面均最高。如果联合检测胸水中IFN-γ及ADA, TB-Ab进行ROC曲线分析后，其曲线下面积由曲线下面积可由原来的.924升高至0.977（P<0.0001）。结论：1.在诊断潜伏性结核感染方面，IGRA较TST优越。在集团感染中，IGRA与暴露水平是结核病发病的高危因素。在确定集团感染控制策略时，应充分考虑在密切分级的基础上联合应用IGRA来选择预防性化疗对象。2. TST阳转对新近结核感染的判定受既往TST直径截断值的影响，当既往TST＜5mm时，诊断价值较大，当TST≥5mm时，诊断价值下降。IGRA对结核感染的判断较TST阳转更优越，特别是IGRA能早期识别新近感染。3.结核化疗不是导致治疗前后IFN-γ水平变化的主要原因。4.单纯检测胸水中IFN-γ水平是诊断结核性胸膜炎的一种较为准确的检测方法,进一步联合ADA、TB-Ab检测可以提高对结核性胸膜炎的诊断价值。