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本实验对影响玻璃化冷冻保存小鼠GV期卵母细胞效果的几个因素进行了研究，如冻前预处理方法、卵母细胞形态、冷冻方法、解冻方法、基础液、胎牛血清浓度等，目的在于筛选适合超低温冷冻保存小鼠GV期卵母细胞的冷冻程序。研究结果如下：1对小鼠GV期裸卵进行不同的冻前预处理，用OPS法冷冻保存，解冻后继续培养成熟，进行体外受精，根据卵裂率分析不同平衡方法对小鼠卵母细胞的毒性作用。结果表明，用EFS40一步法处理0.5min、1min、2min、3min后的卵裂率分别为7.35％、17.02％、12.12％、4.44％；将卵母细胞用EFS20处理0.5min、1min、2min、3min，再移入EFS40处理0.5min后，卵裂率分别为9.15％、10.08％、30.95％、12.41％。表明二步法优于一步法。预处理最佳组合为EFS20(2min)+EFS40(0.5min)。2将完整的卵丘-卵母细胞复合物和用吸管吹掉卵丘的裸卵分别进行玻璃化冷冻，培养成熟后体外受精，卵裂率分别是23.17％、30.96％，差异不显著(P＞0.05)。两者都与未经冷冻保存的对照组(60.00％)有极显著差异(P＜0.01)。3分别用straw法、OPS法、GMP法冷冻保存GV期卵母细胞，结果显示，OPS法(33.07％)与GMP法(33.85％)差异不显著(P＞0.05)，GMP法略优于OPS法，两者与Straw法(10.37％)存在极显著差异(P＜0.01)。三种冷冻方法与未经冷冻保存的对照组(60.00％)存在极显著差异(P＜0.01)。4分别用一步法、二步法和三步法对OPS法冷冻保存的GV期卵母细胞进行解冻，表明二步法解冻(33.62％)和三步法解冻(35.55％)卵裂率极显著优于一步法解冻卵裂率(12.50％)(P＜0.01)，二步法解冻(33.62％)与三步法解冻(35.55％)卵裂率差异不显著(P＞0.05)。5分别用DMEM和DPBS作为玻璃化冷冻液的基础液，对GV期小鼠裸卵进行玻璃化冷冻保存，结果表明，用DMEM(31.25％)或DPBS(30.28％)作为玻璃化冷冻液的基础液效果差异不显著(P＞0.05)。6在玻璃化液中添加不同浓度的胎牛血清的试验显示，玻璃化冷冻液中添加20％胎牛血清效果(33.58％)与不添加胎牛血清效果(6.92％)差异极显著(P＜0.01)，与添加10％胎牛血清效果(21.09％)差异显著(0.01＜P＜0.05)，与添加30％胎牛血清效果(23.66％)差异不显著(P＞0.05)。