活体检测是分析检测技术发展的最高水平,目的是在基本上不干扰机体正常生命活动的情况下进行在体取样分析。与体外检测相比,活体检测结果能够更准确地反映自然界生物体内的生理生化过程。固相微萃取（Solid phase microextraction,SPME）技术因其装置小巧便于携带、操作简单快速、无需溶剂、绿色环保、灵敏度高、易于与多种仪器联用而且容易实现分析自动化等优点,已经得到了广泛应用。SPME的众多优点使其在活体采样中展现出巨大的应用前景。活体SPME采样技术不用破坏或致死生物体,可对同一个体进行追踪研究,大大减少了生物体的消耗,也避免了因个体差异造成的实验误差。但由于生物样品基体干扰严重,大分子的不可逆吸附不仅会导致探头的使用寿命显著降低,还会改变生物体的微环境,影响其新陈代谢。此外,与传统的样品前处理方法不同,SPME为非完全萃取,仅能够萃取样品中一小部分目标分析物,需要进行定量校正,而且定量校正还可以消除由实验方法、实验操作条件、仪器等造成的误差,得到更为准确、可靠的结果。因此,研究新的基质相容性探头及新的活体定量校正方法是开展活体SPME采样技术的首要任务。本文以苹果为研究对象,有机磷农药（Organophosphorus pesticide,OPPs）为目标分析物,制备了聚二甲基硅氧烷/聚（苯乙烯-co-二乙烯基苯）/聚二甲基硅氧烷（PDMS/P（St-co-DVB）/PDMS）探头,对其性能进行了评价,考察了该探头在苹果基质中的基质相容性及使用寿命,建立了直接固相微萃取/气相色谱法（DI-SPME/GC）检测苹果中OPPs残留的方法。在此基础上,采用采样速率法,建立了苹果中OPPs残留检测的原位固相微萃取/气相色谱法（in situ SPME/GC）。通过与传统液-液萃取（Liquid-liquid extraction,LLE）方法的对比验证了活体采样方法的准确性,并对采样速率的适用范围、影响因素及苹果在贮藏过程中的农药残留降解和代谢转化情况进行了研究。主要结果如下:1.PDMS/P（St-co-DVB）/PDMS探头的制备与评价以不锈钢丝为载体,PDMS和P（St-co-DVB）微球为涂层材料,制备了PDMS/P（St-co-DVB）/PDMS SPME探头,对其制备条件进行了优化。考察了PDMS/P（St-co-DVB）/PDMS探头的性能。该探头具有良好的热稳定性、水中稳定性和制备重现性,对二嗪农和毒死蜱的灵敏度及选择性高于商用探头和其它自制探头。此外,对探头在苹果浆中的清洗程序及农药在苹果浆中的稳定性进行了探讨,并着重对该涂层在苹果浆中的基质相容性和使用寿命进行了评价。当萃取后使用水:甲醇（9:1,w/w）的混合试剂快速漂洗10 s,解吸后使用甲醇:丙酮（1:1,w/w）的清洗剂清洗1 min时清洗效果最佳。在最优清洗条件下,该探头能够在苹果浆中连续85次萃取,涂层外观、表面、性能均没有明显下降,表现出了良好的基质相容性和较长的使用寿命。2.直接固相微萃取/气相色谱法检测苹果浆中有机磷农药的方法研究以4种OPPs为目标分析物,苹果浆为基质,优化了直接固相微萃取的萃取条件。在最优的萃取条件下,建立了DI-SPME/GC分析检测苹果浆中OPPs残留量的新方法。方法的线性范围宽,线性相关系数均大于0.99,检测限在0.02-0.54ng/g之间,均低于国标、欧盟和食品法典委员会规定的最大残留限,且RSD在3.58%-8.11%之间,方法精密度好。为了进一步考察该方法在真实样品中的适用性,将建立的方法应用于空白苹果浆样品的检测,均未检测到农药残留的存在。在空白苹果浆中加标,4种OPPs的加标回收率均在74.82%-98.50%之间,RSD在1.97%-13.66%范围内,符合国际上对加标回收率的要求。通过与农业部行业标准的对比,证明了DI-SPME/GC方法在苹果基质OPPs的分析检测中具有很好的应用价值,操作简便、重现性好、灵敏度高、抗基质干扰能力强。3.苹果中农药残留原位固相微萃取-气相色谱检测方法研究采用采样速率法,建立了苹果中二嗪农和毒死蜱两种OPPs残留检测的In situ SPME/GC方法。该方法检测限在0.18-0.20 ng/g之间,低于国标中OPPs的最大残留限量（GB 2763-2016）,方法灵敏度高;五次重复试验的相对标准偏差在0.28%-2.28%之间,方法重现性好、精密度高;通过与传统LLE方法的对比,验证了该方法高的准确性和可靠性。此外,对采样速率的适用范围及影响因素进行了探讨。结果表明,不同分析物在某一采样时间的采样速率具有不同的适用范围,且采样速率与分析物的理化性质及萃取时间有关,而与样品温度和待测物浓度无关。最后将本方法应用于苹果中OPPs的吸收与代谢转化研究,证明了该方法的适用性与优越性。