促红细胞生成素(erythropoietin，EPO)是可以选择性刺激造血干细胞增生分化成红细胞的集落刺激因子。EPO的产生细胞主要位于肾皮质近曲小管周围的间质细胞或基底膜内。慢性肾功能衰竭晚期因肾单位大部分遭破坏，EPO生成量明显减少，同时伴有释放缺陷，致EPO相对或绝对缺乏而导致’肾性贫血。促红细胞生成素于19世纪问世，并于80年代实现了基因重组促红细胞生成素(rh-EPO)的生产，目前已广泛应用于临床。如今rh-EPO已成为治疗。肾性贫血的首选药物。近年研究表明，使用rh-色PO除能较好纠正贫血外，对改善肾功衰竭患者红细胞免疫以及细胞和体液免疫功能等方面都有明显作用。 T淋巴细胞是机体免疫系统内功能最重要的一大细胞群，在正常机体内各个T淋巴细胞亚群相互作用，维持着机体正常的免疫功能。辅助性T细胞在免疫应答中作用复杂，根据其分泌细胞因子的不同，可以将其分为两组功能性亚群，Th1型细胞因子包括IFN-γ、IL-2和TNF-α等，主要辅助细胞免疫应答。Th2型细胞因子包括IL-4、IL-5、IL-6、IL-10，主要辅助体液免疫应答。其中TNF-a和IL-6作为常见的炎性细胞因子，在机体感染过程中起着重要作用。 目的 本研究通过观察慢性肾功能衰竭长期血液透析患者给予不同用法rh-EPO治疗前后免疫球蛋白含量、T淋巴细胞亚群及Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α，Th2型细胞因子IL-4、IL-6、IL-10mRNA水平表达的改变，探讨rh-EPO对患者体液免疫、细胞免疫功能和Th1/Th2型细胞因子的影响，及对免疫紊乱状态的改善情况。并通过对IL-6、TNF-a等炎性因子变化的研究，观察rh-EPO用药后是否能纠正其易感染状况。 材料和方法 1、临床资料：慢性肾衰竭维持性血透患者60例，随机分成3组，每组各20例。A组：给予rh-EPO(益比奥-沈阳三生制药)10000U，每周一次皮下注射；B组：给予相同剂量rh-EPO，每周分2～3次皮下注射；C组：为对照组，不用rh-EPO。 2、实验方法：三组患者分别于治疗前及治疗8周后采血，EDTA抗凝。采用免疫透射比浊法测定免疫球蛋白；采用APAAP酶联免疫分析法测定T淋巴细胞亚群；采用RT-PCR检测Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α，Th2型细胞因子IL-4、IL-6、IL-10mRNA水平的表达。同时观察3组患者治疗期间贫血状况的改善及感染发生率。 3、统计分析：全部结果采用SPSS11.0统计学软件进行分析。 结果 1、生化结果及贫血状况：治疗后RBC总数、Hot和Hb在A组和B组较治疗前均有明显升高(P<0.01)，与对照组相比统计学存在明显差异，但A、B两组之间进行比较无明显统计学差异。而BUN、Scr在治疗后都没有明显变化，与治疗前和对照组相比无显著性差异(P>0.05)。 2、免疫球蛋白治疗前后变化：经rH-EPO治疗后，A、B两组患者IgG改善明显，其中A组由治疗前的8.03±1.12 mg/ml升高为11.56±2.01 mg/ml，而B组由治疗前的8.14±1.35mg/ml升高为10.96±1.67mg/ml，接近正常，与对照组相比，有显著性差异(P<0.01)。但A、B两组之间无显著性差异。IgA、IgM变化不大，统计学处理无差异(P>0.05)。 3、T淋巴细胞亚群治疗前后变化：rh-EPO治疗后，A组CD3+由治疗前的38.27±10.10％提高到49.92±10.63％；B组CD3+由治疗前的38.06±11.20％提高到45.84±11.20％(A组t=3.562，P<0.01；B组t=3.102，P<0.05)。A组CD4+由治疗前的20.50±7.27％提高到30.52±7.63％；B组CD4+由治疗前的22.60±11.38％提高到31.51±9.05％(A组t=2.870，P<0.05； B组t=2.902，P<0.05)，与对照组比较，数量明显增加，而CD8+没有明显变化(P>0.05)，因而导致A、B两组的CD4+/CD8+比例升高，A组由治疗前的1.06±0.54升高为治疗后的1.57±0.53，B组由治疗前的1.06±0.48升高为治疗后的1.70±0.75。但A、B两组之间无明显差异。 4、Th1/Th2类细胞因子mRNA表达水平比较：经rh-EPO治疗后，A组外周血单个核细胞TNF-αmRNA相对表达密度由治疗前的0.68±0.21降为0.26±0.11；B组由治疗前的0.74±0.27降为0.31±0.12。A组IL-4的mRNA相对表达密度由治疗前的0.36±0.18降为0.11±0.04；B组由治疗前的0.42±0.15降为0.13±0.07。A组IL-6的mRNA相对表达密度由治疗前的0.32±0.12降为0.16±0.09；B组由治疗前的0.38±0.14降为0.18±0.10(P<0.01)，与对照组比较，有显著性差异(P<0.01)。A、B两组之间未见到明显差异。由于慢性肾衰竭维持性血透患者均呈免疫功能严重低下状态，未检测到IFN-γ、IL-2和IL-10 mRNA的表达。 5、rh-EPO对维持性血透患者感染发生的影响：3组尿毒症血透患者在8周治疗期间的感染发生例数分别为A组15％(3例)、B组20％(4例)、C组35％(7例)， A、B两组尿毒症患者在EPO治疗期间的感染发生例数均低于对照组，统计学分析显示A、B两组与对照组之间存在统计学差异(A、C组比较x<2>=31.35，P<0.01；B、C组比较x<2>=31.35，P<0.01)。 结论 1、rh-EPO可有效改善尿毒症患者贫血状况。 2、rh-EPO治疗可明显提高CRF患者的IgG浓度，改善患者的体液免疫功能。 3、rh-EPO治疗后CD3+T细胞亚群、CD4+T细胞亚群及CD4+/CD8+比率显著升高，有效调节尿毒症患者T淋巴细胞亚群免疫紊乱的状况。 4、rh-EPO治疗后Th2类细胞因子表达降低，使Th1/Th2平衡向Th1方向转化，有效调节Th1/Th2类细胞因子失衡状态；致炎因子IL-6、TNF-α表达显著降低，抗炎作用增强。 5、rh-EPO治疗后患者感染发生率明显降低，rh-EPO可通过改善贫血及调节机体免疫机能而纠正患者易感染状态。 6、采用rh-EPO一次大剂量皮下注射与每周多次小剂量注射在疗效和对患者免疫功能影响上没有明显区别。