黑果腺肋花楸花青素提取纯化、抗氧化性及稳定性研究

来源 :沈阳化工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sycloverock
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黑果腺肋花楸属蔷薇科多年生落叶灌木,其果实中富含与抗氧化、抗炎及抗肿瘤等生物活性密切相关的花青素。本文采用黑果腺肋花楸为原料,对其果实中的花青素进行了分离纯化、化学结构、稳定性、抗氧化活性及微胶囊的制备等方面研究,为黑果腺肋花楸以后的推广及功能性研究打下一定的基础。
  通过单因素试验分别研究了提取溶剂种类、提取溶剂浓度、料液比、提取温度和提取时间等因素对黑果腺肋花楸花青素提取效果的影响,采用Box-Behnken中心组合试验对其提取工艺进行了优化。确定了花青素提取的最佳条件为:甲醇体积分数60%,料液比1∶5,提取温度50℃,提取时间1.2h。在此工艺条件下花青素的提取得率为0.31%。
  通过比较4种大孔树脂对黑果腺肋花楸花青素的吸附-解吸性能,筛选出最佳纯化树脂HPD-100。分别研究了花青素在该树脂中的静态吸附动力学模型,颗粒扩散模型及其吸附-解吸条件的影响因素和在树脂中的动态吸附泄露曲线,穿透曲线和洗脱曲线。HPD-100大孔树脂对花青素的吸附过程符合准二级动力学模型,以薄膜扩散为主要吸附方式。该树脂对花青素的静态吸附-解吸条件为:花青素提取液pH值3.0,吸附时间4.5h,解吸液pH值3.0,解吸液乙醇体积分数为60%,解吸时间2.5h。动态吸附-解吸条件为:花青素提取液上样量4BV,上样流速为700uL/min,解吸量为5BV,解吸流速为500uL/min。
  经HPLC、HPLC-HRMS鉴定,结合已知的花色苷相对分子质量,二次轰击碎片离子及保留时间可知,黑果腺肋花楸中花青素含有4种花色苷单体,即矢车菊素-3葡萄糖苷(49.04%)、矢车菊素-3阿拉伯糖苷(41.17%)、矢车菊素-3木糖苷(6.45%),还有一种待鉴定。
  黑果腺肋花楸花青素稳定性研究表明,黑果腺肋花楸花青素在酸性条件下比较稳定,且其热降解符合一级降解动力学模型;在pH值为3.0,60℃的条件下,低浓度的Mg2+、Cu2+、Zn2+和Na+使花青素残留率下降缓慢,高浓度的Mg2+、Cu2+、Zn2+和Na+使花青素残留率下降迅速,而Fe2+对花青素具有破坏作用,且随着浓度的增大破坏作用越强;辅色物抗坏血酸在浓度为200mg/L时,对花青素具有保护作用,而苯甲酸钠对花青素具有破坏作用;氧化剂H2O2和还原剂Na2SO3、NaNO3对花青素的稳定性均具有不同程度的破坏作用。
  以抗坏血酸作对照,比较了黑果腺肋花楸花青素纯化物、粗提物的抗氧化性。三者清除DPPH、羟基自由基、超氧阴离子的能力大小依次为:花青素纯化物>抗坏血酸>花青素粗提物。
  为了提高黑果腺肋花楸花青素稳定性,选用锐孔法将花青素微胶囊化。通过单因素试验分别研究了壁材的种类、壁材浓度、壁芯比及氯化钙浓度对花青素包埋率的影响。采用正交试验对其制备工艺进行了优化。确定了花青素微胶囊制备的最佳条件为:壁芯比1∶2.5,壳聚糖浓度为3.5%,氯化钙浓度为2.5%,包埋率可达98.4%。
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