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为研究石英诱导人细胞恶性转化过程中cyclinD1和CDK4表达水平的改变规律及其生物学意义,我们采用反义RNA技术进行了下列研究:1.构建正义pXJ41-cyclinD1、反义pXJ41-cyclinD1及反义pXJ41-CDK4真核细胞表达载体,分别转染石曲恶性转化细胞,同时设立空载体对照.以G418选择性筛选细胞系,利用原位杂交对筛选的细胞系进行鉴定.2.利用原位杂交的方法测定了正常2BS细胞、石英恶性转化的2BS细胞、导入反义pXJ41-cyclinD1的石英恶性转化细胞、导入反义pXJ41-CDK4的石英恶性转化细胞中cyclinD1和CDK4 mRNA的表达水平及定位.3.通过免疫组化的方法测定了正常2BS细胞、石英恶性转化的2BS细胞、导入反义pXJ41-cyclinD1的石英恶性转化细胞、导入反义pXJ41-CDK4的石英恶性转化细胞中cyclinD1和CDK4蛋白的表达水平及定位.4.对正常2BS细胞、石英恶性转化2BS细胞、导入反义pXJ41-cyclinD1的石英恶性转化细胞、导入反义pXJ41-CDK4的石英恶性转化细胞进行了下列指标的测定:生长速度、细胞倍增时间、细胞周期分布、软琼脂克隆形成率,以综合分析cyclinD1和CDK4的生物学作用.该研究发现石英诱导人细胞恶性转化过程中cyclinD1和CDK4过表达,反义cyclinD1 RNA和反义CDK4 RNA可抑制石英恶性转化细胞中cyclinD1和CDK4的过表达从而抑制细胞的生长增殖,使其恶性表型发生逆转,即细胞生长速率下降,倍增时间延长,G1期细胞比例增加,克隆形成率下降等.表明cyclinD1和CDK4的异常表达与石英诱导恶性转化细胞有密切的关系,而且高水平表达的cyclinD1和CDK4对维持恶性转化细胞的恶性性状起重要的作用.