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本研究对影响猪卵母细胞体外成熟的几个主要因素进行了探索,筛选出本实验室条件下猪卵母细胞体外成熟较理想的培养方案,并研究了不同激活方法对猪卵母细胞孤雌发育的影响,为今后核移植克隆猪研究提供技术支持。研究结果如下: 猪卵母细胞在体外培养44h和46h的成熟率（57.56±2.80% vs 61.40±14.44%）显著高于体外培养40h的成熟率（27.26±6.54%）（p<0.05）。猪卵母细胞在20%氧分压的成熟率82.74±5.15%与7%氧分压的成熟率79.59±0.92%无显著性差异（p>0.05）。 不同成熟培养液对猪卵母细胞的后期发育影响很大。猪卵母细胞在TCM-199+SP中的成熟率（82.75±9.21%）与TCM-199+FCS组（79.45±2.35%）、NCSU23+FCS组（76.79±4.07%）和NCSU23+SP组（74.98±9.30%）显著高于NCSU23无血清培养组的成熟率（61.40±4.22%）（p<0.05）。TCM-199+SP组的卵裂率（79.22±2.45%）与TCM-199+FCS组（74.44±5.45%）无显著性差异（p>0.05）,但都显著高于其它三组（p<0.05）。TCM-199+SP组的囊胚率（20.42±6.58%）与TCM-199+FCS组（17.03±8.55%）、NCSU23+FCS组（11.76±0.61%）和NCSU23+SP组（9.97±2.15%）无显著性差异（p>0.05）,但TCM-199+SP组的囊胚率（20.42±6.58%）显著高于NCSU23无血清培养组的囊胚率（8.01±1.41%）（p<0.05）。TCM-199+SP组的囊胚细胞数（38±4.83）显著高于其它四组（29±4.39、18.75±3.09、23.25±4.27、16.50±2.38）（p<0.05）。培养液中不添加任何生长因子的卵母细胞的成熟率（62.61±4.97%）和卵裂率（58.72±0.70%）都显著低于添加bFGF组（72.94±1.33%,72.07±5.75%）和EGF组（79.54±2.87%,75.87±5.69%）（p<0.05）。添加bFGF组的成熟率、卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数（72.94±1.33%,72.07±5.75%,18.69±4.64%,21±2.00）和EGF组（79.54±2.87%,75.87±5.69%,17.73±10.33%,18.33±2.08）之间无显著性差异（p>0.05）。 试验采用乙醇、离子霉素+6-DMAP、电脉冲+化学激活三种不同激活方法,激活后卵母细胞的卵裂率分别为8.61±1.43%、17.58±1.42%、72.90±5.59%;三组间两两差异显著（p<0.05）,电脉冲+化学激活效果最好,离子霉素+6-DMAP次之,乙醇效果最差。离子霉素+6-DMAP激活组的囊胚率（6.93±0.90%）与乙醇激活组（1.44±2.50%）无显著性差异（p>0.05）,但都显著低于电脉冲+化学激活的囊胚率（18.08±3.69%）（p<0.05）。电激活液中0.05mM Ca2+浓度时的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数（75.47±4.29%、16.51±1.44%、23.33±2.51）和0.1mM Ca2+浓度时的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数（76.32±2.70%、16.93±2.34%、26.66±6.65）无显著性差异（p>0.05）。 电场强度为0.8kv/cm和1.2v/cm时卵裂率（81.31±9.03%vs72.90±5.59%）和囊胚率（17.09±2.53%vs18.08±3.69%）无显著差异（p>0.05）,但均显著高于电场强度为1.6kv/cm时卵裂率（50.96±7.29%）和囊胚率（8.17±3.49%）。三种场强下的囊胚细胞数（29.33±2.51、28.33±4.04、29.00±4.00）无显著性差异（p>0.05）。脉冲时程在30μs,40μs,50μs时的卵裂率（74.46±3.87%,88.86±0.62%,49.12±8.96%）差异显著（p<0.05）,40μs时卵裂率最高,50μs时卵裂率最低。40μs时的囊胚率（18.45±2.30%）显著高于50μs时的囊胚率（9.36±6.32%）。脉冲时程在30μs,40μs,50μs时的囊胚细胞数（26.76+2.54,25.20±2.30,24.00±3.46）无显著性差异（p>0.05）。电脉冲联合CB+CHX组的卵裂率（79.55±3.85%）显著高于CB组（72.90±5.59%）和CHX组（71.55±3.78%）,（p<0.05）。三种处理后猪体外成熟卵母细胞的囊胚率、囊胚细胞数无显著差异（p>0.05）。