近年来,感染性疾病的发病率越来越高,尤其是新型病毒以及多药耐药菌的出现,对人们的身心健康造成了不可磨灭的影响。同时,作为杀菌,抑菌首选药的抗生素,虽然经过不断地创新,却还是不能改变耐药性细菌层出不穷的局面,究其原因是抗生素类药物或化学合成类药物是诱发细菌产生保护机制的罪魁祸首。因而,寻找新型抗菌药物迫在眉睫。中药由于具有不易产生细菌耐药性的特殊抗菌机理,成为近年来人们研究抗菌药物的热点。因为中药材苦参根数量稀少,且不可持续利用,本课题选用能可持续利用的苦参种子作为研究对象。将苦参种子与苦参根的化学成分进行对比,同时,结合抗菌效果,筛选药用抗菌成分的提取方法与提取溶剂,并将药用活性部位进一步分离纯化得到单体化合物,为深入研究抗菌活性成分的构效关系提供科学依据。具体研究内容及结果如下:1.分别以石油醚,氯仿,乙酸乙酯,无水乙醇,80%乙醇为溶剂,采用超声提取,加压提取,回流提取,微波提取等方法提取苦参种子中的抑菌活性成分,并以抑菌强度为实验指标,从中选择提取苦参种子抗菌活性成分的最佳提取溶剂与提取方法。结果表明:苦参种子的石油醚、氯仿、乙酸乙酯的提取液均无抑菌作用,而醇提物的抑菌作用由小到大的顺序为:无水乙醇提取物<80%乙醇提取物;四种方法提取物的抗菌性由强到弱的顺序依次为:超声提取>加压提取>微波提取>回流提取。2.采用上述四种提取方法提取苦参药材中的抗菌活性成分,结合薄层层析以及抑菌实验,将苦参根与苦参种子成分进行初步的对比。结果表明:薄层图谱显示苦参种子与苦参根在成分上存在明显的差异;抗菌实验证明,苦参种子的抑菌活性成分极性较大,而苦参根的抑菌活性成分极性相对较小。苦参根与种子均对革兰氏阳性菌表现出较强的抑菌性,且苦参种子80%乙醇提取液的最小抑菌浓度大约在5 mg/mL-10 mg/mL之间。3.将苦参种子与苦参根80%的醇提物按极性顺序依次萃取为石油醚层,乙酸乙酯层和正丁醇层。采用化学鉴别、薄层层析、HPLC等方法对上述三层物质的成分及活性进行分析。化学鉴别的方法表明,苦参根与苦参种子所含成分有较大的差别,苦参种子醇提物所含的酚类成分,萜类成分,有机酸类成分,生物碱类成分以及黄酮类成分多偏中等极性及大极性。薄层研究表明,加压提取和超声提取这两种方法提取的苦参种子化学成分基本一致,但与苦参根成分差别较大。苦参种子醇提物基本不含小极性的生物碱,而大极性的生物碱与苦参根相差也较大。HPLC分析表明,苦参种子醇提物在乙酸乙酯层中所含的成分极性相对较小,苦参根所含的成分极性范围较广。抗菌活性实验表明,采用超声提取和加压提取均不影响苦参种子抑菌活性成分的提取,并且二者提取的乙酸乙酯层均具有一定的抑菌效果。4.苦参种子80%醇提物的乙酸乙酯层为研究对象,综合运用硅胶柱层析,凝胶柱层层析以及高效制备液相色谱等手段进行一系列的分离纯化,共分离得到5个单体化合物,采用紫外,质谱,核磁等方法鉴定为:(1)β-谷甾醇;(2)5,7-二轻基-4’甲氧基异黄酮(鹰嘴豆芽素A);(3)5,7,3’-三羟基-4’-甲氧基异黄酮(红车轴草素,首次在苦参中发现);(4)7,4’-二羟基异黄酮(大豆素);(5)3’,4’-二羟基-7-甲氧基异黄酮(未知化合物,含量较高)。油脂类成分通过GC-MS检测出48个组分,其中亚油酸为其主要成分,含量可达32.76%,其余低极性成分含量均较低,是否为新化合物有待进一步研究。综上所述,作为能够可持续利用的药材,本课题初步研究了苦参种子的抗菌活性成分,明确了苦参种子与苦参根之间的差异,分离纯化出苦参种子抗菌活性单体化合物,以期为归纳、总结抗菌活性与结构之间的内部联系,抵制耐药菌的再生与增长开辟一条崭新的道路。