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目的:
通过研究人参皂甙Rh2（G-Rh2）对T淋巴细胞非霍奇金淋巴瘤(TcellNon-Hodgkinlymphoma，T-NHL)细胞系HUT-78增殖、凋亡、血管形成及免疫调节的影响，并联合蛋白酶体抑制剂硼替佐咪(BTZ)及氟达拉滨(FLU)方案对T-NHL的体外抗肿瘤作用进行研究，探讨人参皂甙Rh2与BTZ和FLU联合治疗对T-NHL细胞及其微环境的影响，阐明人参皂甙Rh2能否增强T-NHL细胞对BTZ和FLU联合化疗的敏感性，并从信号转导角度探讨其可能的分子机制，为T-NHL治疗提供新的治疗思路和理论依据。
方法:
1.通过MTT法测定G-Rh2、BTZ、FLU单药作用于T细胞淋巴细胞细胞系HUT-78的半数抑制浓度IC50，以获取后续实验的适宜药物浓度。
2.利用流式细胞术检测G-Rh2、BTZ、FLU单药及联合应用对HUT-78细胞周期分布的影响。
3.利用流式细胞术检测G-Rh2、BTZ、FLU单药及联合应用对HUT-78细胞凋亡的影响。
4.通过Westernblot检测G-Rh2、BTZ、FLU单药及联合应用对HUT-78细胞cleavedcaspase-3、Bcl-XL、Bax、P65蛋白的表达影响。
结果:
1.MTT实验显示:BTZ、FLU单药及联合应用都有较强的细胞增殖抑制作用，且联合应用该作用更为明显，而G-Rh2单药作用于HUT-78细胞系抑制细胞增殖作用不明显，但与BTZ、FLU联合应用时能增强化疗药物的细胞增殖抑制作用。
2.流式细胞术测定细胞周期:G-Rh2的对HUT-78细胞系细胞周期的影响没有具体的时相性，但FLU主要使该细胞停滞在G0-G1期，而BTZ主要使细胞停滞在S期。
3.流式细胞术测定细胞凋亡:G-Rh2、BTZ、FLU均有促进细胞凋亡的作用，且联合用药的作用更为显著。
4.Westernblot实验显示:G-Rh2、BTZ、FLU单药及联合均有促进HUT-78细胞系促凋亡蛋白表达，抑制抗凋亡蛋白表达的作用，且G-Rh2能够促进化疗药物的促凋亡作用。
5.Westernblot实验显示:G-Rh2、BTZ、FLU均能抑制NF-κB途径的活化，且三药联合时这种作用最强。
结论:
1.FLU、BTZ两药均有浓度和时间依赖性，且FLU这种趋势更明显;G-RH2本身抑制细胞增殖的作用不明显，但与化疗联合后能明显提高肿瘤细胞对化疗药的敏感性;FLU+BTZ的协同作用不明显，但与G-RH2联合后协同作用明显加强。
2.细胞周期方面:FLU把肿瘤细胞主要抑制在G0/G1期，细胞属于静止期，细胞增殖减慢;BTZ主要使肿瘤细胞停止在S期，细胞处于DNA合成期;药物对细胞周期的作用成浓度依赖性;但G-Rh2为细胞周期非依赖性药物。
3.细胞凋亡方面:FLU对于细胞增殖的抑制作用强于诱导凋亡的作用;BTZ的诱导凋亡作用更为突出;G-Rh2单药促凋亡作用较弱，但联合化疗后细胞凋亡比例明显增加。
4.Westernblot结果显示，在上样量相同的情况下，单药与多药干预均能使细胞凋亡情况加强，且多药联合作用强于单药，以三药联合结果最为明显，导致这一结果的原因可能与联合用药抑制细胞NF-kB通路有关;不同顺序给予化疗药，后提取蛋白进行Westernblot，结果以先予BTZ再给FLU的顺序，凋亡最为明显，这可能与药物作用的周期状态、引发凋亡的特性有关。