【摘 要】
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目的:葛根素（Puerarin,Pue）是临床上常用于心血管保护的天然异黄酮类中药,在心脏缺血再灌注损伤（IRI）中具有保护作用。本文旨在研究Pue在体外IRI缺氧复氧（A/R）损伤模型中的保护作用及可能的机制。方法:1.通过CCK-8检测不同浓度Pue（0、2.5、5、10、20、40和80μM）对H9c2的药物毒性,A/R损伤模型于Pue预处理48小时后建立。2.按处理方法将H9c2心肌样细胞
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目的:葛根素（Puerarin,Pue）是临床上常用于心血管保护的天然异黄酮类中药,在心脏缺血再灌注损伤（IRI）中具有保护作用。本文旨在研究Pue在体外IRI缺氧复氧（A/R）损伤模型中的保护作用及可能的机制。方法:1.通过CCK-8检测不同浓度Pue（0、2.5、5、10、20、40和80μM）对H9c2的药物毒性,A/R损伤模型于Pue预处理48小时后建立。2.按处理方法将H9c2心肌样细胞分为对照组、A/R组、Pue/铁死亡抑制剂（Fer-1,5μM）预处理后A/R损伤的4组,Fer-1提前2h预处理,通过CCK-8和LDH检测细胞活性,MAD、ROS、GSH/GSSG、铁离子定量以及GPX4和PTGS2的m RNA和蛋白水平表达方面检测铁死亡指标。3分子对接预测Pue与VDAC1结合可能。用Pue预处理转染p AD-VDAC1过表达病毒后进行A/R处理,并用空载病毒组做对照,检测细胞活性、铁死亡相关指标及线粒体膜通道等相关功能。结果:1.合适浓度Pue作用对正常H9c2细胞活力无明显影响,且可以保护H9c2在A/R过程中的损伤。2.A/R处理会导致H9c2心肌细胞铁死亡,而Pue预处理可起到铁死亡保护作用。3.VDAC1与Pue存在合适的结合可能。4.Pue可能通过抑制VDAC1减轻A/R诱导的心肌细胞铁死亡。5.Pue可能通过抑制VDAC1调控线粒体膜电位及线粒体膜通透性转换孔活性,并促进细胞凋亡。结论:1.Pue预处理可以有效减轻A/R损伤模型中H9c2心肌细胞的损伤。2.Pue可保护缺氧复氧损伤中VDAC1介导的铁死亡和细胞凋亡。
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