【摘 要】
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目的:探究淋巴组织淋巴瘤易位蛋白1（Mucosa Associated Lymphoid Tissue Lymphoma Translocation Protein 1,MALT1）对前列腺癌细胞增殖、生长、凋亡、迁移及侵袭能力与体内成瘤能力的影响。方法:通过q RT-PCR（Quantitative real time PCR）和Western blot的方法检测MALT1在不同前列腺癌细胞系L
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目的:探究淋巴组织淋巴瘤易位蛋白1（Mucosa Associated Lymphoid Tissue Lymphoma Translocation Protein 1,MALT1）对前列腺癌细胞增殖、生长、凋亡、迁移及侵袭能力与体内成瘤能力的影响。方法:通过q RT-PCR（Quantitative real time PCR）和Western blot的方法检测MALT1在不同前列腺癌细胞系LNCa P、DU-145、PC-3和前列腺上皮细胞系RWPE-1之间的表达差异。分别用构建MALT1基因特异性RNA干扰慢病毒载体（sh MALT1）和对应的对照载体（sh Ctrl）,感染前列腺癌细胞系（PC-3和LNCa P细胞）,并设置为MALT1敲减组（sh MALT1组）与阴性对照组（sh Ctrl组）,通过q RT-PCR以及Western blot技术分别检测被转染细胞中MALT1 m RNA、MALT1蛋白的表达水平,验证敲减效果。在细胞模型构建的基础上,两组分别采用MTT实验、平板克隆实验、流式细胞术、Transwell迁移实验和Transwell侵袭实验检测MALT1表达改变对前列腺癌细胞增殖、集落形成、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。此外,于SPF级别条件饲养裸鼠,将sh MALT1和sh Ctrl慢病毒感染的处于对数生长期的LNCa P细胞接种于BALB/C裸鼠皮下,构建小鼠异种移植瘤模型,分别设置为sh MALT1组与sh Ctrl组。在移植瘤模型构建的基础上,动态观察皮下肿瘤的生长情况,于第31天处死裸鼠后取瘤体称重,并通过免疫组化法检测瘤体组织中Ki-67蛋白的表达情况。结果:q RT-PCR和Western blot实验证实MALT1在多种前列腺癌细胞系中的表达显著高于前列腺上皮细胞株RWPE-1（P＜0.001）。在LNCa P和PC-3细胞系中敲低MALT1后,sh MALT1组的细胞MALT1 m RNA的表达较sh Ctrl组明显减少（P＜0.001）。在sh MALT1组中,两种细胞系的增殖、集落形成、侵袭和转移能力受到明显抑制,且凋亡率较sh Ctrl组明显增加（P＜0.05）。裸鼠成瘤实验结果显示sh MALT1组的裸鼠肿瘤体积和重量较sh Ctrl组明显减小（P＜0.001）,此外,sh MALT1组裸鼠移植瘤组织的Ki-67表达阳性率比sh Ctrl组更低（P＜0.001）。结论:体外实验表明,抑制MALT1的表达可抑制前列腺癌细胞的增殖、集落形成、转移,并促进前列腺癌细胞凋亡。裸鼠成瘤实验结果证明,抑制MALT1后裸鼠皮下移植瘤生长缓慢,成瘤性明显下降。提示MALT1可以促进前列腺癌的发生发展,并可能是治疗前列腺癌的潜在分子靶标。
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