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外界环境病原微生物主要通过空气传播感染并导致肉牛疾病的发生,圈舍消毒为预防和控制病原微生物传播的关键措施。我国肉牛规模化养殖较奶牛、猪、鸡等畜禽起步晚,养殖场（户）对牛场使用消毒剂的种类、浓度配制以及消毒频率等常带有主观性,导致圈舍实际消毒效果不佳。目前,由于我国南方肉牛圈舍以半封闭式为主,其消毒周期及消毒方式也不同于猪鸡的全封闭式和奶牛的开放式。因此,针对半封闭式牛舍,开展适宜的消毒模式和消毒效果评价研究,具有一定的实际生产指导意义。1、四种消毒剂对肉牛舍气溶胶中细菌与气载内毒素浓度的影响2020年4～5月在广安某规模化牛场,开展了四种消毒剂对肉牛舍气溶胶中细菌与气载内毒素浓度的影响。消毒前一天09:30用清水喷雾,消毒当日09:30用过氧乙酸（稀释倍数为1:300）、聚维酮碘（1:1500）、戊二醛癸甲溴铵（1:750）和过硫酸氢钾复合粉（1:200）分别对A、B、C和D圈舍其中一栋进行喷雾消毒;消毒前、后在11:00、12:30和14:00收集各牛舍气溶胶中细菌及气载内毒素样品。结果:1)过氧乙酸消毒后1,2,3,4和6层级细菌浓度分别下降11.36%、13.39%、5.73%、11.40%和9.40%,5层级上升2.94%;聚维酮碘消毒后1和3层级分别下降3.63%和0.66%,2、4、5和6层级分别上升0.34%、2.71%、16.52%和18.20%;戊二醛癸甲溴铵消毒后1～4层级分别下降14.83%、11.86%、11.25%和11.07%,5和6层级分别上升14.89%和91.95%,其中1,2层级细菌浓度显著低于消毒前（P＜0.05）;过硫酸氢钾复合盐消毒后1、2和3层级分别下降7.79%、8.07%、6.70%,4、5和6层级分别上升0.81%、5.31%和36.54%;表明综上,戊二醛癸甲溴铵和过氧乙酸的消毒效果优于过硫酸氢钾和聚维酮碘。2)经Spearman相关性分析发现半封闭牛舍用戊二醛癸甲溴铵、聚维酮碘及过氧乙酸消毒后气溶胶中细菌浓度与圈舍湿度显著相关（P＜0.05）,表明消毒效果与空气湿度有关;过硫酸氢钾复合盐消毒后与圈舍温度显著相关（P＜0.05）,表明消毒效果与温度有关。3)戊二醛癸甲溴铵、聚维酮碘、过氧乙酸及过硫酸氢钾复合盐消毒后牛舍中气载内毒素浓度分别上升1.65%、0.47%、2.51%和3.72%,表明消毒后会导致圈舍气载内毒素呈现升高趋势。2、不同稀释倍数戊二醛癸甲溴铵对气溶胶中细菌及气载内毒素浓度的影响不同稀释浓度戊二醛癸甲溴铵对牛舍中气溶胶中细菌、气载内毒素浓度的影响。结果:1)使用1:250稀释戊二醛癸甲溴铵溶液消毒后1～6层级细菌浓度分别下降26.95%、32.35%、38.01%、40.39%、44.81%和35.67%;2,4,5和6层级细菌浓度显著低于消毒前（P＜0.05）;使用1:500稀释戊二醛癸甲溴铵溶液消毒后1～6层级细菌浓度分别下降5.89%、6.36%、11.94%、13.27%、16.41%及13.64%;使用1:750稀释戊二醛癸甲溴铵消毒后1层级细菌浓度上升1.68%,2～6层级分别下降4.65%、3.41%、11.75%、21.91%和34.87%,其中5和6层级细菌浓度显著低于消毒前（P＜0.05）;使用1:1000稀释戊二醛癸甲溴铵溶液消毒后2,3和4层级分别下降6.54%、0.98%、8.00%,1,4和5层级分别上升0.07%、12.38%和12.14%。表明稀释浓度高于1:500的戊二醛癸甲溴铵消毒后降低气溶胶中细菌浓度均具有较好的消毒效果。2)经Spearman相关性分析消毒后半封闭牛舍使用不同稀释倍数戊二醛癸甲溴铵消毒后气溶胶中细菌浓度与圈舍温度和湿度显著相关,表明消毒效果受空气温、湿度影响。3)1:250、1:500、1:750和1:1000戊二醛癸甲溴铵消毒后的气载内毒素浓度上升率分别为16.84%、14.70%、7.43%、12.14%。表明消毒后会导致圈舍气载内毒素呈现上升趋势,同时1:250和1:500戊二醛癸甲溴铵消毒后的气载内毒素浓度上升率高于1:750和1:1000戊二醛癸甲溴铵。3、不同频次戊二醛癸甲溴铵消毒对肉牛舍气溶胶中细菌群落结构影响利用第三代高通量测序技术研究不同消毒频率对牛舍气溶胶中细菌群落结构的影响。采集1月未消毒的圈舍气溶胶样本为I组,每天消毒1次的次日样本为II组,隔2天消毒1次的次日样本为III组,隔6天消毒1次的次日样本为IV组;按上述消毒频率每次收集1个样本,共收集3样本。结果:α多样性分析显示,II组的Chao1指数、Shannon指数、ACE指数和Observed＿species指数均低于II、III、IV组。OTU聚类分析显示,Firmicutes、Bacteroidetes、Actinobacteria、Proteobacteria为各试验组优势菌门。以I组为参照,其他各组中相对丰度变化大于0.5%的菌属:1)增高的包括:II组Corynebacterium、Caulobacter、Atopostipes、Alloiococcus及Acinetobacter,III组Atopostipes、Corynebacterium、Prevotell,IV组Atopostipes、Corynebacterium、Romboutsia、Salinicoccus及Paeniclostridium;2)降低的包括:II组Bacteroides、Psychrobacter、Jeotgalicoccus及Prevotella,III组Psychrobacter和Acinetobacter,IV组Psychrobacter、Bacteroides、Acinetobacter及Pseudomonas。综上,频繁消毒能明显降低气溶胶中细菌多样性,尤其对牛舍气溶胶中革兰氏阴性菌具有较好的消毒效果。结论:（1）戊二醛癸甲溴铵、过氧乙酸及聚维酮碘消毒效果与湿度显著相关,过硫酸氢钾消毒效果与温度显著相关;戊二醛癸甲溴铵（1:750）和过氧乙酸（1:300）对肉牛舍气溶胶中细菌消毒效果优于过硫酸氢钾复合盐（1:200）和聚维酮碘（1:1500）。（2）使用稀释倍数高于1:500戊二醛癸甲溴铵对牛舍气溶胶中细菌具有良好的消杀效果;按1:250、1:500稀释戊二醛癸甲溴铵消毒后的牛舍气载内毒素浓度高于1:1000和1:750稀释戊二醛癸甲溴铵。（3）戊二醛癸甲溴铵每日1次消毒能明显降低气溶胶中细菌多样性;尤其对牛舍气溶胶中革兰氏阴性菌具有较好的消杀效果。