林烟草钾转运体基因NsHAK11的克隆与功能分析

来源 :中国农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jibbsb12
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
钾是植物必不可缺的大量元素,作为细胞内的主要溶质,参与植物的生长发育过程。植物中存在低亲和性和高亲和性两种钾吸收系统。钾转运体是高亲和性钾吸收系统的重要组成部分,在植物K+的跨膜运输中起重要作用。钾转运体包括4个家族,KUP/HAK/KT、HKT/Trk、CHX和KEA,其中,KUP/HAK/KT家族成员最多,且研究最为深入。其成员是广泛存在于植物细胞质膜和液泡膜上的一种跨膜蛋白,多具有高亲和性钾吸收功能的转运体。KUP/HAK/KT转运体不仅在植物对K+的跨膜运输中起重要作用,也参与调节植物的生长发育。本研究采用生物信息学方法分析林烟草(Nicotiana sylvestris)和绒毛状烟草(N. tomentosiformis)KUP/HAK/KT家族成员,构建系统进化树,并根据所获结果,从林烟草中获得一个KUP/HAK/KT家族基因NsHAK11,并对其核苷酸序列、氨基酸序列、与启动子序列进行了分析,同时,对NsHAK11基因的表达特性进行了研究,进而预测其可能具有的生理功能。具体内容有以下四个方面:(1)本研究应用生物信息学方法,搜索林烟草和绒毛状烟草基因组数据库,预测到两种烟草KUP/HAK/KT钾转运体家族成员均含有19个成员,编码长度在1326—3669bp之间,跨膜区数量在7—14个之间。对所有成员构建基因进化树,发现进化上分为4个Cluster(簇)。(2)利用生物信息学方法所获结果,从林烟草中分离一个KUP/HAK/KT家族基因,该基因cDNA序列全长2391bp,可编码一个由796个氨基酸组成的蛋白质。该蛋白与拟南芥(Arabidopsisthaliana)中AtKUP11的相似性最高,因此,将其命名为NsHAK11,其编码蛋白与早期获得的两个烟草NrHAK1和NtHAK1的相似性仅为48%和49%,所以NsHAK11是一个新的烟草KUP/HAK/KT家族基因。(3)应用Wolf PSORT、Softberry-ProtComp9.0和CELLO v.2.5网站预测显示NsHAK11主要定位于细胞膜中。通过亚细胞定位实验对预测结果进行验证,NsHAK11与GFP和DsRed2两种报告蛋白融合的定位结果均发现NsHAK11可能定位于细胞质膜中,与预测结果相符。(4)利用PLACE网站对NsHAK11启动子分析得到,NsHAK11可在根、花和胚芽组织中表达,受到低温、高温、干旱和激素因素的影响。利用荧光定量RT-PCR技术,对NsHAK11的组织表达、低温、NaCl、高温和低钾胁迫下的表达情况进行了分析。发现NsHAK11在盛花期林烟草各组织器官中均有表达,其在主根中的表达量最高,在侧根中的表达量次之,而在叶片中的表达量最低。低温处理时NsHAK11表达量上调程度最大且响应时间最早,高温处理时其表达量上调程度次之,但在前期会出现明显抑制,而在高盐和低钾处理时其表达量均可上调表达,但在盐胁迫下NsHAK11的表达变化更为显著。
其他文献
实现教育的个体享用功能,不仅是培养“人”的教育目的的要求,更是人最终实现自由和幸福的关键。对个体享用功能的认识和理解不仅关系到教育的性质和定位,更是涉及到人的存在意义。然而,教育的个体享用功能作为实现教育内在价值和人的生命意义的载体和作用物,不仅在理论研究上存在着缺乏重视的问题,在实践中还面临着外在功利性因素的压迫。在物质生活极大丰富、精神需要快速更迭的今天,如何在这样的物质生活和精神生活中实现个
随着民航业快速发展,持续快速增长的航空运输需求与有限的空域资源之间的矛盾逐渐凸显,导致空域拥挤现象日益严重。因此,对空域扇区的拥挤现象进行监控,将有助于空中交通管理部门掌握空域拥挤情况,为日常运行和空域规划提供决策支持。本文对扇区拥挤等级识别和预测进行研究,包括扇区拥挤指标构建、拥挤识别模型以及拥挤预测方法三个方面的内容。本文从复杂网络的角度,将扇区拥挤程度识别问题转化为扇区内航空器网络复杂性的综
近年来,中国汽车的产销量急剧增长,汽车物流成为了我国经济的重要增长点。随着汽车行业竞争的日益激烈,汽车物流已被众多汽车制造企业作为可挖掘潜力、提高竞争力的最佳途径。物流外包也以其能降低运作成本、强化核心竞争力、加速组织重构、提高企业的反应速度等优点而迅速成为一种新的汽车制造企业经营战略。从国内外汽车行业的发展趋势看,第三方物流模式将成为主导型物流模式。本文从汽车整车物流的特点出发,以F汽车公司为例
着舰降落是舰载直升机飞行任务里必不可少的阶段,由于流场环境变差及降落平台不规则运动等因素,在该阶段的飞行事故率较高。为对着舰过程进行研究,本文主要对直升机着舰过程进行了仿真实现,建立了舰机模型和交互系统,为使着舰过程能够直观表现,进一步设计了三维仿真视景。本文首先根据叶素理论和挥舞动力学方程估算旋翼气动力,之后建立了直升机的非线性系统模型。针对直升机系统自身的强耦合、欠驱动和非线性特性,传统的单输
深圳C公司在世界3C电子产品产业链中排名世界第一的公司。随着经济全球化的不断深化,C公司面临劳动力成本不断上涨、原材料成本高涨、客户需求的多样化、产品生命周期的越来越短、市场竞争更加激烈等难题。本论文研究意义在于:立足C公司的精益生产制造系统,探索研究德国工业4.0、美国工业互联网等的前沿理论,并结合中国实际国情,对中国精益制造进行工业4.0升级改造的理论依据。本论文的现实意义在于:通过工业4.0
造血干细胞移植在临床血液病治疗,肿瘤放化疗病人恢复,以及一些遗传病的治疗等方面有着巨大的作用。由于其疗效在很大程度上取决于移植细胞的数量,而造血干细胞在体外却很难
单甘油酯脂肪酶(Monoglyceride lipase,简称MGLP)是一类具有特殊底物专一性的脂肪酶,它们对脂肪酸的甘油三酯和甘油二酯没有水解效果,只对单甘油酯具有水解活性。由于单甘油酯脂肪
本文着重于Bi5FeTi3O15(BFTO)层状钙钛矿多铁薄膜的制备及其掺杂薄膜材料的微结构、铁电、磁性等研究。通过分析B位掺杂对材料性能的影响,阐述了影响BFTO薄膜性能的一些原因
核糖体是由核糖体蛋白和RNA组成,是细胞内翻译的重要机器,与细胞的生长、细胞对各种生理状态的适应都有很密切的关系。在植物中有将近200个核糖体蛋白基因都必须协同表达,只
氧分子离子是低空大气中含量最丰富的离子之一。氧分子离子精确的光谱参数和分子常数在物理、化学、生物、医学等基础领域,以及交叉学科和前沿学科等相关领域中有十分重要的