ω-3 PUFAs通过Fra1/Fra2调控C57BL/6J小鼠脂质代谢作用

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本研究以C57BL/6J小鼠为实验对象,以高脂饲料组为对照组,用不同组成的ω-3PUFA(ALA、DHA、DHA:EPA=2:1、DHA:EPA=1:1、DHA:EPA=1:2)对其进行干预,观察ω-3PUFA对C57BL/6J小鼠脂质代谢的影响。观察小鼠生长状况,发现与CG组相比,ω-3PUFA干预组体重都有所下降,且均有非常显著的差异(P<0.01)。高脂饲料对照组CG组的肝脏脏器指数值最大,与CG组相比,ALA、不同比率DHA/EPA干预组肝脏脏器指数值均有非常显著的降低(P<0.01)。在DHA/EPA干预组中,DHA:EPA=2:1组,效果最佳;ALA在各干预组中,抑制肝脏脏器指数效果最优。从肝脏组织油红O染色切片也可以看出各ω-3PUFA干预组肝脏组织中脂滴明显比高脂对照组少,但比普通饲料组肝脏组织中脂滴多。测定各实验组小鼠血清中脂质代谢相关常见指标TC、TG、LDL-C和HDL-C和肝脏TC、TG浓度,与高脂饲料对照组CG组相比,ALA、各不同比率DHA/EPA干预组C57BL/6J小鼠血清中TC、TG、LDL-C和肝脏TC、TG浓度均有显著性降低(P<0.05);ALA干预对C57BL/6J小鼠血清中TC、TG、LDL-C浓度降低效果最佳;在各不同比率DHA/EPA干预组中DHA降低效果最佳。与CG组相比,ALA、各不同比率DHA/EPA干预组C57BL/6J小鼠血清中HDL-C浓度均有显著性升高(P<0.01);ALA干预对C57BL/6J小鼠血清中HDL-C浓度升高效果最佳;在各不同比率DHA/EPA干预组中DHA升高效果最佳,其次为DHA/EPA为1:2干预组。测定C57BL/6J小鼠血清中GSH、SOD、MDA浓度,发现与CG组相比,ALA、不同比率DHA/EPA干预组均能有效提升血清中GSH浓度(P<0.05),DHA干预后提升效果最佳(P<0.01),其次为ALA干预组;与CG组相比,ALA、DHA、DHA/EPA为2:1干预组均能显著提升血清中SOD活性(P<0.05);DHA/EPA为1:1和1:2时,干预后可以提升血清中SOD活性,但无显著性差异(P>0.05);与CG组相比,ALA、DHA、DHA/EPA为1:1和1:2干预组,均可以显著降低血清中MDA浓度(P<0.05);DHA/EPA为2:1干预组可降低血清中MDA浓度,但无显著性差异(P>0.05)。ω-3PUFA能有效减少高脂饮食诱导的小鼠血脂的升高,减少肝脏中的脂质堆积,减缓高脂饮食引起的体重增加,并在一定程度上增加机体的抗氧化能力,减少肝脏损伤。采用荧光定量PCR方法测定C57BL/6J小鼠脂质代谢相关酶mRNA表达水平,与CG组相比,Fra1/Fra2、AMPK、PPARα、CPT-1、HSL、ACOX基因mRNA表达水平均显著提高(P<0.05),各干预组Fra1、AMPK、PPARα、ACOXmRNA表达水平提升效果依次为ALA、DHA、DHA:EPA=1:2、DHA:EPA=1:1、DHA:EPA=2:1,与CG组相比,ALA、各不同比率DHA/EPA干预组对C57BL/6J小鼠肝脏组织中Fra2基因mRNA表达水平均提升极显著(P<0.01),但不同组成的ω-3PUFA干预效果没有明显差异,HSL基因mRNA表达水平提升效果依次为:DHA、DHA:EPA=1:1、ALA、DHA:EPA=2:1、DHA:EPA=1:2组;与CG组相比,SREBP-1C、PPARγ、ACC-1、FAS、SCD-1基因mRNA表达水平均显著下降(P<0.05),ALA干预组降低最为明显,其次分别为DHA、DHA/EPA=1:2、DHA/EPA=1:1、DHA/EPA=2:1干预组。ω-3PUFA可能同时通过调控Fra1/Fra2和AMPK抑制小鼠肝脏脂肪酸合成和促进小鼠肝脏脂肪酸氧化来有效地减少肝脏组织中脂质堆积,对肝脏起到一定保护作用。并通过免疫组化方法和western blot方法对小鼠肝脏组织中Fra1蛋白表达水平进行分析,发现与CG组相比,ALA、各不同比率DHA/EPA干预组对C57BL/6J小鼠肝脏组织中Fra1 mRNA表达水平和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);对肝脏组织中Fra1蛋白表达水平提升效果分别为:ALA、DHA、DHA:EPA=1:2、DHA:EPA=1:1、DHA:EPA=2:1干预组,提升趋势与Fra1基因mRNA表达水平提升趋势一致。ω-3PUFA可能通过促进Fra1表达,抑制PPARγ基因表达,从而达到对脂质代谢的调控。总之,不同组成的ω-3PUFA均对高脂诱导的C57BL/6J小鼠脂质代谢具有较好的调控作用,减少肝脏组织中脂质合成,并对脂质代谢上游调控基因Fra1/Fra2有较强的促进表达作用。不同组成的ω-3PUFA通过促进Fra1/Fra2基因表达,抑制PPARγ基因,从而调控高脂诱导的小鼠脂质代谢,干预效果:ALA>DHA>DHA:EPA=1:2>DHA:EPA=1:1>DHA:EPA=2:1组。ω-3PUFA虽然能一定程度上保护高脂饮食诱导的肝损伤,但并不能完全消除高脂饮食带来的伤害,保持一种良好的生活习惯,才能避免一些脂质代谢异常引发的慢性疾病的发生。
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