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1926年至今，新城疫一直危害着世界养禽业，并对野生鸟类的健康构成了潜在威胁。由于NDV在野鸟中存在广泛的隐性感染，因此野鸟被认为是NDV的天然贮存库，调查野鸟携带NDV的状况对ND的防控具有重要的意义。 本研究在2014年春季采集了558份野鸟粪便样品，采用极限稀释法对这些样品中的NDV进行分离和纯化，结合血凝试验和RT-PCR的方法进行鉴定。结果表明，558份样品中共分离出17株NDV，分离率为3％。之后，我们对17株NDV的F基因进行T载体克隆和测序，使用生物学软件对它们的核甘酸序列以及推导的氨基酸序列进行分析,并将这些序列与国内外NDV部分分离株的相应核甘酸序列以及其推导的氨基酸序列进行同源性比较和遗传进化分析。结果表明，17分离株属于NDV ClassⅡ类，其中10株基因Ⅰ型，7株基因Ⅱ型；基因Ⅰ型和基因Ⅱ型分离株的F基因的核苷酸和氨基酸分别于与V4株和La Sota株处于同一进化分支。参考NDV ZJ-1分离株的基因组全序，设计11对引物扩增其中3株NDV（Wild bird/HN/150/2014，简称―HN150；Wild bird/JL/TZ70/2014，简称―TZ70；wild bird/JL/M50/2014，简称―M50）基因组序列，分析3株NDV的6个编码基因与参考株编码基因的核苷酸和氨基酸的相似性，比较它们之间F和HN蛋白的序列差异。F蛋白功能区域分析结果显示：HN150、TZ70与V4疫苗株相同，M50与La Sota疫苗株一致。对HN蛋白重要抗原位点分析表明，M50与La Sota疫苗株的HN蛋白功能区一致，而HN150和70的HN蛋白第113位和350位氨基酸分别由R替换为Q，H替换为Y。此外，3株NDV的各基因与同型参考毒株各基因的相似性最高。 ICPI、IVPI以及MDT的实验结果表明，这3株病毒对SPF鸡均呈低致病性。为确定3株病毒在鸡体内的适应性和复制能力，我们以106EID50/100μL的剂量感染4周龄SPF鸡，分别于感染后第三天和第五天采集它们的脏器、喉拭子和泄殖腔拭子进行病毒滴度检测。组织嗜性结果显示，3株NDV分离株都能在鸡体内全身性的复制，但是在3d.p.i，基因Ⅰ型NDV在小肠和气管中复制增殖的速度快于它们在脑内复制增殖的速度，5d.p.i时，基因Ⅰ型分离株HN150和基因Ⅱ型分离株M50在小肠内的复制能力都显著的高于它们5d.p.i时在脑内的复制能力。对脾脏、胰腺和法氏囊中的病毒滴定结果表明，3株NDV分离株都能在这些脏器中复制增殖，5d.p.i时3株分离株在这三个脏器中的拷贝数都显著高于3d.p.i时的拷贝数。通过检测HN150、TZ70、M50和La Sota之间交叉血凝抑制，以确定它们之间的抗原差异。血清交互实验结果表明：M50与疫苗株La Sota无抗原差异，R值为1.0；HN150、TZ70与La Sota存在抗原差异，分别为0.707和0.631。 野鸟作为NDV的贮藏宿主，在NDV的传播与扩散中的作用应该引起足够的重视。NDV分离地点和分离宿主的不同，使本研究野鸟源NDV分离株的基因型存在多样性：其中11株属于基因Ⅰ型，7株属于基因Ⅱ型。3株NDV分离株基因组全长均为15186bp，未发现碱基的插入、缺失；HN150株、TZ70株与V4株的全基因组核苷酸的相似性分别为99.4%和99.0%，M50株与La Sota株的全基因组核苷酸的相似性为99%。3株NDV分离株的F蛋白氨基酸未发现替换或缺失，仅HN150株和TZ70株的HN蛋白出现两个氨基酸的替换（Q113R, Y350H）。3株NDV分离株都能在鸡体内全身性的复制，表现出对消化道和呼吸道的偏嗜性；基因型的差异，使得基因Ⅱ型分离株的组织嗜性和复制能力强于基因Ⅰ型分离株。2株基因Ⅰ型分离株和La Sota株存在抗原差异，基因Ⅱ型分离株与La Sota株无抗原差异。