P物质对大鼠睡眠—觉醒周期和情绪活动的影响及其作用机制

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目的:应用情绪行为活动测定、脑立体定位、侧脑室插管、微量注射、多导睡眠描记和免疫组织化学等方法,观察P物质和其拮抗剂(N-acetyl-L-tryptophan 3,5-bis(trifluoromethyl)-benzyl ester,NALTBE)对大鼠睡眠-觉醒周期及其情绪活动的影响。 方法:80只成年雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为睡眠记录组和情绪行为组。睡眠记录组大鼠经水合氯醛(350mg/kg)腹腔注射麻醉后,将头部固定于SN-2型脑立体定位仪上,暴露颅骨,双氧水清洁颅骨表面,在冠状缝前2mm及人字缝前1mm与颅骨中线两侧旁开1mm交叉点处分别安装EEG电极,深度以穿透颅骨接触到硬脑膜为度,用于记录皮层脑电活动;在双侧颈肌内插入EMG电极用于记录肌电活动。EEG、EMG记录电极引导线均连接到一个微型插座上。外径为23gauge(0.6mm,OD)的不锈钢引导管按Paxinos和Watson大鼠脑立体定位图谱插入:右侧脑室(AP:-0.8mm,R:+1.5mm、H:-4mm),引导管顶端距侧脑室1mm,供侧脑室内微量注射药物用。所有电极和引导管均用牙科水泥固定于大鼠的颅骨上。情绪行为组大鼠只埋入引导管,不安装电极。 手术后,大鼠在记录舱内饲养1周以恢复和适应环境。睡眠记录组进一步分为:PBS注射组(PBS,0.1M,PH=7.4,n=8);SP 1 pmol组(n=8);SP 10 pmol组(n=8);SP 100 pmol组(n=8);Anti-sP组(N-acetyl-L-tryptophan
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