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目的高脂血症使得种植体的周围骨丧失增加,新骨质形成减少,但是机制不明。本实验借助RNA测序技术,筛选高脂血症大鼠种植体周围骨组织中差异显著的RNA分子,构建基因共表达网络,并研究高脂血症抑制种植体周围骨形成的可能调控机制。方法1.20只约4周的雄性Wistar大鼠,随机均分为实验组和对照组,分别以高脂、普通饲料喂养。8周后,检测两组动物的血清脂质水平。确认实验组建模成功后,两组动物于双侧的股骨干骺端植入纯钛种植体。术后10天处死,获取包含种植体在内及其周围1mm骨组织的样本。2.分别取实验组和对照组的部分样本,经固定、包埋后获得硬组织切片,采用苏木素伊红染液染色后,观察结合界面和周围的成骨细胞、骨形成。3.取两组的部分样本行RNA测序,检测差异表达的信使RNA(messenger RNA,mRNA)、长链非编码 RNA(long noncoding RNA,lncRNA)、微小 RNA(microRNA,miRNA)和环状 RNA(circular RNA,circRNA)。通过基因本体论(Gene Ontology,GO)分析、京都基因与基因组百科全书信号通路(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析,推测这些 RNA 功能,建立lncRNA-miRNA-mRNA、circRNA-miRNA-mRNA 的共表达网络。聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,RT-PCR)验证部分 RNA 的表达水平。4.8只约4周的雄性Wistar大鼠,均以高脂饲料喂养。按如上方法确认建模成功后,在种植术前三天,实验组肌注慢病毒载体构建的过表达的miR-193a-3p,对照组肌注阴性对照液。种植体植入后10天,取材并用RT-PCR检测miR-193a,Sdccag3,lnc MSTRG97162.4,lnc MSTRG78883.18 和 ALP、Runx2 的表达水平。结果1.实验组血脂浓度的平均值显著高于对照组的(P<0.05)。2.与对照组相比,实验组成骨细胞排列紊乱,数目较少,植体周围新骨生成降低。3.在两组中,有 389mRNA,70miRNA,770 1ncRNA 和 7circRNA 差异表达(P<0.05,差异倍率>2)。这些差异表达RNA的功能分析显示,retromer复合体、肌动蛋白细胞骨架等相关的生物学过程,以及成骨、成脂代谢相关的信号通路发生明显变化。4.建立与成骨相关的 lncRNA-miRNA-mRNA、circRNA-miRNA-mRNA 共表达网络,RT-PCR显示这些RNA的表达水平与测序结果一致。5.过表达的miR-193a后,实验组miR-193a-3p的表达升高(P<0.05),Sdccag3、lncMSTRG97162.4、ALP、Runx2 的表达降低(P<0.05),lncMSTRG78883.18 的表达无明显差异(P>0.05)。结论1.高脂血症使得大鼠种植体周围的骨形成减少。2.差异表达的mRNA,miRNA,lncRNA和circRNA构成基因共表达网络,调控高脂血症大鼠种植体周围骨形成。3.MiR-193 a-3 p抑制高脂血症大鼠种植体周围的骨形成,这种抑制作用可能通过 lnc MSTRG 97162.4-miR-193 a-3 p-Sdccag3 调控网络实现。