不同入肝血流阻断法对肝硬化大鼠肝脏缺血再灌注后凋亡相关因子及HO-1mRNA的影响

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目的:   探讨三种不同入肝血流阻断法对肝硬化大鼠肝缺血再灌注后凋亡相关因子及H0-1mRNA表达的影响。   方法:   122只雄性Wistar大鼠采用四氯化碳皮下注射法复制大鼠肝硬变模型,将96只成模的Wistar大鼠随机分为pringle法组(PR组,n=32)、半肝阻断组(HH组,n=32)和保留半肝动脉血供的入肝血流阻断组(WH组,n=32),每组依再灌注时间又分为4个亚组(n=8)。各组阻断入肝血流15min后,去血管央恢复血流,关腹。分别于再灌注后1h、3h、6h、24h抽腹主动脉血检测ALT和AST水平,取肝右叶行肝脏病理学及免疫组化染色法测定Bcl-2及Caspase-3蛋白表达情况,Real-timePCR法检测肝脏HO-1mRNA表达情况。所得数据以均数±标准差(x±)表示,用SPSS13.0软件对各组均数进行单因素方差分析(one-wayANOVA),方差齐性时各组之间多重比较采用S-N-K检验;方差不齐时采用多重比较的DunnettT3检验,以上检验均以P<0.05认为有统计学意义。   结果:   HE染色及masson染色证实肝硬化模型成立,不同入肝血流阻断模型成功建立,PR组缺血再灌注后24小时ALT、AST。水平明显高于HH组、WH组(P<0.05),肝脏病理学变化重于HH组与WH组;Bcl-2蛋白随再灌注时间延长先降后升(3h最低,P<0.05),PR组表达低于HH组和WH组(P<0.05),HH组与WH组之间无明显差异;Caspase-3蛋白随再灌注时间延长表达逐渐升高,PR组高于HH组及WH组(P<0.05),HH、WH两组之间比较无显著差异。H0-1mRNA表达PR组低于HH组及WH组(6h最高,P<0.05),HH、WH两组之间比较无显著差异。   结论:   保留半肝动脉血供的入肝血流阻断法对肝脏缺血再灌注损伤轻,与Pringle法相比,保留半肝动脉血供阻断法及半肝阻断法Bcl-2蛋白、HO-1mRNA的表达升高、Caspase-3表达降低,从而减少肝细胞凋亡,减轻再灌注损伤。
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