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本文以根结线虫（Meloidogyne sp.）和甘薯茎线虫（Ditylenchus destrctor）为靶标,通过系统筛选,获得了其代谢产物具有高杀线虫活性的菌株Snf009。对菌株Snf009进行了形态学鉴定、发酵培养基及发酵条件的优化、代谢物中活性物质的分离提纯及定性、定量分析、温室防效、大田防效试验和安全性评价进行了系统的研究,结果如下:1.通过形态学鉴定菌株Snf009为黑曲霉（Aspergillus niger）,分类地位为有丝分裂孢子菌类,丝孢纲,丝孢目,丛梗孢科,曲霉属,黑曲霉。通过GUGS-50型发酵罐制备浓缩发酵液5L。其对南方根结线虫（M.incognita）二龄幼虫的有效中浓度EC50为7.07μL·mL-1;对甘薯茎线虫（D.destructor）的EC50为142.71μL·mL-1。2.在发酵培养基的优化试验中,首先筛选出适合菌株Snf009产生杀线虫活性物质的最优碳、氮源,明确了菌株摇瓶发酵培养基以麦芽糖和淀粉复合为最佳碳源,以尿素为最佳氮源。在单因子试验中,结果表明麦芽糖用量在3～4%、淀粉用量2～3%、尿素用量在0.2～0.4%为宜,硫酸镁和氯化钾在一定程度上会影响Snf009发酵液的杀线虫活性。利用二次回归正交旋转设计对培养基的的各组份进行定量化的分析,确定碳、氮源和无机盐与菌株Snf009的发酵液对根结线虫和茎线虫致死率的回归方程,对根结线虫二龄幼虫的死亡率取极大值求解可得最佳发酵培养基为:麦芽糖用量在4.04%、淀粉用量2.45%、尿素用量为0.29%、MgSO4 7H2O为0.06%、KCl为0.04%。将此配方再加上原始培养基中的K2HPO40.1%、、Fe SO4 0.001%发酵菌株Snf009所得的发酵液对根结线虫二龄幼虫的致死率理论上可达到76.74%。对甘薯茎线虫的死亡率取极大值求解可得最佳发酵培养基为:麦芽糖用量在4.71%、淀粉用量2.12%、尿素用量为0.05%、MgSO4 7H2O为0.05%、KCl为0.07%。将此配方再加上原始培养基中的K2HPO40.1%、Fe SO4 0.001%发酵菌株Snf009所得的发酵液对茎线虫的致死率理论上可达到38.21%通过均匀试验来检测不同发酵条件对菌株Snf009产生杀线虫活性物质的影响,同样将菌株Snf009发酵液对根结线虫和茎线虫的致死率和各发酵条件之间建立回归方程。对南方根结线虫二龄幼虫的死亡率取极大值求解可得最佳发酵工艺为:时间10d、pH为5.13、转速为105r·min-1、温度为40℃、通气量50L·min-1。在此条件下菌株Snf009发酵液对南方根结线虫二龄幼虫可达到的理论致死率为77.63%。对甘薯茎线虫的死亡率取极大值求解可得最佳发酵工艺为:时间12d、pH为3.14、温度为40℃、通气量28L·min-1。试验结果表明转速因子为不显著可取最大转速135r·min-1在此条件下菌株Snf009发酵液对甘薯茎线虫可达到的理论致死率为83.1%。最后对优化培养基和优化发酵条件进行验证试验,结果表明实测死亡率除了在茎线虫的发酵条件优化的预测值有所偏差外,其余都基本与理论值相符合,这进一步说明回归方程能较准确的在一定范围内预测菌株Snf009发酵液对上述两种线虫的致死活性。3.采用Doskochilova溶剂系统和pH纸层析和纸电泳初步推断菌株Snf009的活性成分为多组分,并且主要活性物质为酸性。通过试验得出发酵液中总酸含量以草酸计为20.79 g/L,含有主要的有机酸为草酸,外标法测得草酸含量为18.8g/L,与含量为142.71mL/L和7.06 mL/L的发酵液具有相同pH的草酸对甘薯茎线虫和南方根结线虫的平均死亡率为45%和62%,与发酵液的86%与69%相比有显著差异。通过外标法测得柠檬酸含量为4.56 g·L-1,设置发酵液、草酸+柠檬酸、草酸及柠檬酸四个处理,分别在pH为3到7的环境下测定对南方根结线虫二龄幼虫的致死率和对卵囊孵化的影响。试验表明,不同pH处理之间表现为pH从7到3二龄幼虫的死亡率逐渐升高,卵囊孵化的线虫数量在pH≥5与pH＜5时有显著差异。发酵液、草酸+柠檬酸、草酸及柠檬酸和二龄幼虫的死亡率的关系为:发酵液＞草酸＞草酸+柠檬酸＞柠檬酸,发酵液处理和其它处理相比显著抑制卵囊孵化,草酸+柠檬酸的混合酸处理对卵囊孵化稍有刺激作用,其它处理间差异均不显著。本文对黑曲霉菌株Snf009发酵液中的另一种对线虫有活性的物质A进行了分离提纯和结构鉴定,通过紫外可见光吸收光谱、红外光谱、质谱和核磁共振确定了其分子量为:244,分子式为C9O6N2H12的一种核糖杂环类化合物。此物质在微量条件下对根结线虫有活性。4.通过对温室番茄根结线虫的防效试验,菌株发酵液的防效在30d和60d能达到近50%与空白对照之间差异显著。通过对甘薯茎线虫的防效验,发酵液处理的防治效果能达到63.89%,而5%涕灭威颗粒剂的防效达到了近99%,并且二者的病情指数均值与对照比差异显著。5.根据对菌株Snf009发酵液对雌雄大鼠经皮LD50分别为:雄性大鼠:＞2150mg·kg-1;雌性大鼠:＞2150 mg·kg-1的试验结果,此发酵液大鼠经皮毒性属于“低毒”级。根据对菌株Snf009发酵液对雌雄大鼠经口LD50分别为:雄性大鼠:＞5000 mg·kg-1;雌性大鼠:＞5000mg·kg-1的试验结果,此发酵液大鼠经口毒性属于“微毒”级。