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研究背景和目的:活化蛋白C(a PC)在多种疾病模型中发挥细胞保护作用,其细胞保护作用的发挥主要与抗氧化作用有关。p66Shc是线粒体中重要的氧化还原状态感知蛋白,它可以从胞浆转位至线粒体然后促进线粒体ROS的生成。目前研究表明,氧化应激导致的内皮损伤及炎症细胞侵润引起的动脉中膜层病变是引起主动脉夹层发生发展的重要因素,那么,研究活化蛋白C对衔接蛋白p66Shc在主动脉夹层(AD)的形成与发展中的调控作用有助于我们进一步了解主动脉夹层的发病机制。方法:收集AD患者及相应健康对照的血浆和主动脉标本,及其各项病历资料。采用ELISA方法检测两组血浆中的a PC活性;对AD患者及健康对照组的组织切片进行HE染色,ROS染色;提取组织蛋白和RNA,采用Western blot及Real-time PCR检测各组中p66Shc、PCNA的表达。建立血管紧张素(Ang II)诱导的Apo E-/-小鼠主动脉夹层动物模型,检测小鼠血浆中a PC含量,监测建模过程中血压、主动脉超声等指标。获取小鼠主动脉标本,进行HE染色。提取RNA,采用Real-Time PCR检测p66Shc的表达。使用Ang II诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)模拟在体主动脉夹层的模型,采用Western Blot和Real-time PCR检测p66Shc、PCNA等指标随Ang II浓度和作用时间的表达规律。使用a PC预处理细胞,分析其对Ang II诱导的p66Shc、PCNA、ROS的抑制作用。结果:与对照组相比,AD患者主动脉受损,分真腔假腔,其血浆中a PC活性降低,p66Shc和PCNA的表达升高,ROS产生增加。成功建立Ang II诱导的Apo E-/-小鼠AD模型。与对照组相比,其血压水平显著升高,主动脉直径明显增宽,主动脉大体标本可见主动脉假腔及血栓形成,主动脉组织p66Shc表达升高。体外细胞实验显示,适宜浓度(10-7mol/L)的Ang II刺激可引起人脐静脉内皮细胞p66Shc、PCNA表达增高,在此过程中可以观察到p66Shc及PCNA的升高具有时间依赖性。在使用PC和a PC预孵育后再次使用Ang II刺激,可以观察到,p66Shc及PCNA、ROS的表达均较前降低。结论:主动脉夹层患者的血浆中a PC含量较之对照组显著降低,其病理标本中衔接蛋白p66Shc的表达显著增高。在小鼠主动脉夹层模型中,在对模型小鼠标本的分析中,我们得到了类似的结果。在体外细胞实验中,Ang II可以诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达p66Shc,而a PC则可抑制Ang II所诱导的p66Shc的表达。由此我们可以假设内源性a PC含量的下降及主动脉组织衔接蛋白p66Shc的表达增加可能是主动脉夹层发生发展的一个重要机制,因此a PC可能是主动脉夹层诊疗的一个潜在有意义的靶点。