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目的:研究DJ-1通过Nrf2信号通路增强BMSCs抗氧化应激的作用及其机制。方法:（1）采用小鼠胫腓骨进行全骨髓培养法提取、纯化、培养BMSCs至第三代,用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD44,鉴定其纯度;分别对其成骨、成脂、成软骨诱导分化,碱性磷酸酶鉴定其成骨分化潜能,油红0染色鉴定其成脂潜能,阿利辛蓝染色鉴定其成软骨潜能;（2）采用慢病毒载体将DJ-1基因转染BMSCs,用嘌呤霉素筛选稳定株,采用q PCR与Western Blot检测细胞内DJ-1m RN A量及DJ-1蛋白表达量;体外以浓度为500μmol/L的H2O2处理BMSC s制造“氧化应激损伤模型”,实验分4组进行:A组（BMSCs）,B组（BMSCs+H2O2）,C组（BMSCs/Lv-EGFP+H2O2）,D组（BMSCs/Lv-DJ-1-EGFP+H2O2）,通过检测各组细胞内氧化损伤（ROS含量、Annexin V/PI检测细胞凋亡率）及抗氧化酶（Mn SOD、CAT、GPx）蛋白表达量评估DJ-1对BMSCs抗氧化应激损伤的作用;（3）采用慢病毒载体DJ-1 m RNA、Nrf2si RNA基因转染BMSCs,用嘌呤霉素筛选稳定株,实验分4组进行:E组（BMSCs+NCsi RNA）,F组（BMSCs+H202）,G组（BMSCs/Lv-DJ-1+H202）,H组（BMSCs/Lv-DJ-1/Nrf2si RNA+H202）,Western Blot检测不同条件下BMSCs内DJ-1、Nrf2及抗氧化酶（Mn SOD、CAT、GPx）蛋白表达的变化,观察沉默Nrf2并过表达DJ-1时,对BMSCs内Mn SOD、CAT、GPx蛋白表达的影响;免疫共沉淀（Co-IP）检测氧化应激条件下DJ-1过表达对BMSCs胞质中Nrf2-Keap1的解离情况;Western Blot检测氧化应激条件下DJ-1过表达对BMSCs胞核中Nrf2核转位变化;（4）SPSS 22.0统计软件包进行单因素方差分析,P<0.05具有统计学意义。结果:（1）成功提取、分离、培养、复苏和鉴定BMSCs,BMSCs纯度>99%;（2）DJ-1基因表达及蛋白表达结果分别显示,DJ-1过表达组与空病毒组相比较,m RNA量上调（3.36±0.16）倍,DJ-1蛋白相对表达量为（1.71±0.14）倍,差异均具有统计学意义（P<0.05）;（3）（1）测得各组BMSCs内ROS含量:A组（8.22±2.35）倍、B组（99.32±5.32）倍、C组（97.44±4.55）倍、D组（13.40±2.21）倍,D组与C组相比,ROS含量明显减少,差异具有统计学意义（P<0.05）;B组与A相比,ROS含量明显增加,差异具有统计学意义（P<0.05）;D组与A组及B组与C组比较无统计学意义。（2）Annexin V/PI检测BMSCs凋亡率:A组（5.20±1.62）%、B组（52.70±4.12）%、C组（56.40±3.87）%、D组（9.39±2.08）%;D组与C组相比,凋亡率明显减少,差异具有统计学意义（P<0.05）;B组与A相比,凋亡率明显增加,差异具有统计学意义（P<0.05）;D组与A组及B组与C组比较差异均无统计学意义。（3）测得各组BMSCs内抗氧化酶（Mn SOD、CAT、GPx）蛋白相对表达量:A组Mn SOD相对表达量（1.18±0.12）倍、CAT相对表达量（1.20±0.13）倍、GPx相对表达量（0.97±0.11）倍,B组Mn SOD相对表达量（0.21±0.11）倍、C AT相对表达量（0.27±0.13）倍、GPx相对表达量（0.28±0.13）倍,C组Mn SOD相对表达量（0.22±0.08）倍、CAT相对表达量（0.22±0.10）倍、GPx相对表达量（0.28±0.09）倍,D组Mn SOD相对表达量（1.11±0.16）倍、CAT相对表达量（1.05±0.14）倍、GPx相对表达量（0.91±0.13）倍;D组与C组相比,抗氧化酶相对表达量明显增加,差异具有统计学意义（P<0.05）;B组与A相比,抗氧化酶相对表达量明显减少,差异具有统计学意义（P<0.05）;D组与A组及B组与C组比较差异均无统计学意义。（4）测得各组DJ-1与Nrf2在不同条件下对BMSCs中抗氧化酶相对表达量为:E组Nrf2相对表达量（0.87±0.10）倍,DJ-1相对表达量（0.47±0.09）倍,Mn SOD相对表达量（0.88±0.10）倍、CAT相对表达量（0.86±0.11）倍、GPx相对表达量（0.55±0.12）倍,F组Nrf2相对表达量（0.84±0.07）倍,DJ-1相对表达量（0.23±0.11）倍,Mn SOD相对表达量（0.21±0.10）倍、CAT相对表达量（0.25±0.12）倍、GPx相对表达量（0.09±0.07）倍,G组Nrf2相对表达量（0.87±0.11）倍,DJ-1相对表达量（1.01±0.11）倍,Mn SOD相对表达量（1.11±0.12）倍、CAT相对表达量（0.98±0.09）倍、GPx相对表达量（0.90±0.11）倍,H组Nrf2相对表达量（0.08±0.03）倍,DJ-1相对表达量（0.96±0.09）倍,Mn SOD相对表达量（0.22±0.13）倍、CAT相对表达量（0.27±0.05）倍、GPx相对表达量（0.25±0.07）倍;G组与H组比较,抗氧化酶相对表达量明显升高,差异具有统计学意义（P<0.05）;F组与E组比较,抗氧化酶含量明显降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。（5）免疫共沉淀测得BMSCs中游离Keap1相对表达量:A组相对表达量（1.15±0.11）倍、B组相对表达量（0.84±0.12）倍、C组相对表达量（0.72±0.10）倍、D组相对表达量（0.13±0.07）倍,D组与C组相比,Keap1相对表达量明显减少,差异具有统计学意义（P<0.05）。（6）测得C-Nrf2蛋白组中A组相对表达量（0.65±0.05）倍、B组相对表达量（0.45±0.06）倍、C组相对表达量（0.41±0.07）倍、D组相对表达量（0.02±0.02）倍;N-Nrf2蛋白组中A组相对表达量（0.33±0.04）倍、B组相对表达量（0.52±0.05）倍、C组相对表达量（0.56±0.06）倍、D组相对表达量（0.90±0.09）倍;DJ-1过表达条件下,N-Nrf2蛋白相对表达量明显大于C-Nrf2蛋白含量,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:DJ-1通过Keap-Nrf2-ARE抗氧化分子信号通路促进抗氧化酶（Mn SOD、CAT及GPx）的表达,增强BMSCs抗氧化应激能力。