芥蓝（Brassica oleracea）是我国华南有名的抗癌保健蔬菜,随着我国物流运输行业,保鲜储藏技术的发展,芥蓝等蔬菜需求量大幅度增加,但南方高温、多雨天气导致病虫害发生严重,使产量品质受到很大影响。虽然近些年来有新品种出现,但是仍然不能满足市场需求,尤其是抗逆性资源匮乏、品种退化的现象严重,急需对现有品种资源进行更新。植物遗传转化可以定向改变植物的目标遗传性状,快速培育出抗逆性品种以适应逆境环境。目前报道芥蓝遗传转化主要以子叶和下胚轴为转化材料,存在转化效率低,难以应用于实际生产的问题。胚性愈伤组织与悬浮细胞系是遗传转化的理想受体之一,而芥蓝愈伤组织培养研究较少,芥蓝悬细胞浮培养体系未见报道。本试验以‘福州黄花’芥蓝为试验材料诱导出不同类型愈伤组织,探究芥蓝愈伤组织诱导、增殖培养与植株再生的培养条件,建立稳定的芥蓝松散型愈伤组织再生培养体系;以继代2次以上的松散型愈伤组织为试验材料,探究愈伤组织增殖条件及悬浮培养生长规律,建立芥蓝悬浮培养体系;以‘顺宝芥蓝’下胚轴为外植体,探究芥蓝遗传转化培养条件,为基因工程育种提供合适的试验体系。试验结果如下:1、建立稳定的芥蓝松散型愈伤组织再生培养体系以‘福州黄花’芥蓝为材料,研究芥蓝愈伤组织诱导、增殖培养与植株再生的培养条件。结果表明,最适基本培养基为1/2MS和B5培养基;四种类型愈伤组织中Ⅰ类型愈伤组织增殖较快且为松散型愈伤组织,其在第12 d时愈伤组织增殖最快,第6 d细胞活力最高,其继代周期为第9 d;三种愈伤组织进行分化培养发现,三种类型愈伤组织均能分化,其中Ⅱ类型愈伤组织分化率最高为92.13%,其次是Ⅲ类型愈伤组织,再次是Ⅰ类型愈伤组织。2、芥蓝悬浮细胞培养体系的建立以继代2次以上的松散型愈伤组织为材料,探究松散型愈伤组织增殖与悬浮培养体系生长规律。结果表明,0.5 mg/L 6-BA+2.5mg/L 2,4-D诱导的松散型愈伤组织最佳;2,4-D浓度在1-2 mg/L时松散型愈伤组织增殖最佳,且增殖的愈伤组织为浅黄色颗粒状;悬浮细胞培养生长曲线呈“S”型,0-3 d为延迟期,6-9 d为指数期,第9-12 d时到达稳定期,第9-12 d是最佳的继代周期,p H值呈现下降趋势,在12 d时下降趋势减慢,初始接种量在0.8 g/50 m L鲜重达到最大。3、ABD2基因的芥蓝遗传转化以‘顺宝芥蓝’下胚轴为受体,从Hyg浓度,Carb浓度,预培养,侵染时间,乙酰丁香酮浓度等因素出发探究并建立芥蓝遗传转化体系。结果表明,Hyg浓度在10 mg/L,Carb浓度为200-400 mg/L范围内均抑制未转化下胚轴分化,使其最终褐化死亡;500 mg/L Carb对抑菌效果最好,且较少影响下胚轴不定芽的分化;预培养时间4 d时芥蓝下胚轴抗性芽诱导率最高,在侵染液中加入200μmo/L乙酰丁香酮抗性芽率最高。在这些条件下获得了6株抗性植株,其中4株检测阳性,转化率0.56%,并在阳性植株上检测出目的基因表达的丝状骨架。